3-25号答疑——加标回收是怎么弄的？怎么计算？

回收率是用来干嘛的？

验证方法的准确度

 

具体操作

1.选择加标的浓度

如何选择加标的浓度？

一般是1倍定量限，3倍定量限，10倍定量限。

 

什么是定量限？什么是准确度？

嗯，这些都是基本概念自己去查资料。看完了实在是不理解，这时候寻求帮助才有意义。

 

2.每个加标浓度做3个平行，要求高的实验做6个（即n=6）我们按3个来讲。

 

3.称样12个样品。样品是随便选吗？这个问题很难。如果不想太麻烦的话，就选没有待测物的样品。有待测物也没有关系，尽量不要比加标浓度高太多。

 

空白3个、第一个加标浓度3个，第二个加标浓度3个，第三个加标浓度3个

总共12个

 

4.空白不加（后面的步骤是按前处理方法做）

 

后面的9个，计算好要加入的标液的量，然后加入标液到样品中，（后面的步骤和空白的处理方法一样。）

 

以下我们默认样品是没有待测物的。

 

加入多少体积的标液，和你用多大浓度的标液加有关。第一种情况，比如你要加1mg/kg ,然后你的标准是1mg/ml，我们需要知道什么呢？我们需要知道称了几克样

 

举例：称样品5g,提取之后，提取液定容到50 ml，取10ml提取液进行操作，最后定容到1ml ,然后上机测定。

 

那么要加多少呢？

 

这样计算，首先1mg/kg我们进行单位换算，就是1μg/g，我们称了5g ,也就是说我们要加5μg进去。

 

标液浓度是1mg/ml，单位换算之后就是，1000μg/ml,我们要求的是体积，即加入多少毫升（或者微升），体积=质量÷浓度。代入进去就是0.005 ml 即5μl

 

公式的运用前是，最好将所有的单位都换算称同一个级别的。不然很容易算错单位。

 

万能公式：加入的体积=加标浓度×称样量÷标液的浓度

 

第二种情况，假如你要加标的浓度是5μg/ml，这里的5μg/ml指的是我们上机测定后，标曲去计算得出的值，也就是说我们要加到这个数值，这种情况我们要怎么算呢？

 

举例：称样品5 g,提取之后，提取液定容到50 ml，取10 ml提取液进行操作，最后定容到1ml ,然后上机测定。

 

这种情况就要逆推了。逆推出来原来的样品含量应该是多少？

 

直接就用5μg/ml×定容体积1ml，就是5μg，10ml里有5μg，那么50 ml有25μg，也就是说我们要加25μg的待测物进去。

 

同理

 

标液浓度是1mg/ml，单位换算之后就是，1000μg/ml,我们要求的是体积，即加入多少毫升（或者微升），体积=质量÷浓度。带入进去就是0.025ml 即25μl

 

5.上机

理论值

第一种情况：我们称样量为5g,提取之后5μg的待测物就会均匀的分散到50ml里，那么取的10ml里会有1μg，最后定容到1ml，那么上机测出来的结果就应该是1μg/ml

 

第二种情况： 理论值就是5μg/ml

 

回收率=实测值÷理论值×100％

（如果你选用的样品含有待测物，那么你必须用实测值减去空白值再去除于理论值）