安诺伦代理Abbexa——人SH2B衔接蛋白1(SH2B1)ELISA试剂盒
Abbexa 是一家专门为生命科学、药物开发和生物技术领域提供生物工具的全球供应商。Abbexa 为科学界提供一抗、二抗、蛋白质、ELISA 试剂盒和酶以及其他专为研究而设计的试剂盒和工具,产品涵盖单克隆抗体、多克隆抗体、纯化蛋白质及生物试剂。
品牌优势:
1.产品量多时厂家提供的折扣力度大;
2.直邮产品,货期短;
3.厂家拥有专业的技术团队,他们随时可以帮助解决任何疑问,并热衷于提供答案和解决方案,24小时内回应问题,响应快,解决度百分百,可提供退/换货服务
具体案例分析:
试剂盒名称:Human SH2B Adaptor Protein 1 (SH2B1) ELISA Kit
货号:abx383165
规格:96tests
存储温度:按试剂盒说明,标准品、96孔板及A、B液置于-20℃,其余产品置于2-8℃冰箱
此产品用于科学研究,研究目的:检测不同体重状态人群SH2B1水平,验证肥胖相关基因多态性与蛋白表达差异
实验流程:
一、标准品制备
1、离心标准品
2、取1000ul标准稀释缓冲液加入标准品中,充分混匀,静置10分钟,此为标准管1
3、在标准管2、3、4、5、6、7中加入标准稀释缓冲液500ul
4、从标准管1中取出500ul加入标准管2,充分混匀,从标准管2中取出500ul加入标准管3,依次进行梯度稀释
5、标准管8为空白对照,加入标准稀释缓冲液500ul
二、预实验样品制备
1、准备标本1、标本2
2、将标本1使用样品稀释缓冲液进行稀释10倍,20倍,50倍,标记为样品管1、2、3(样品管1为50ul样品+450ul样品稀释缓冲液,样品管2为25ul样品+475ul样品稀释缓冲液,样品管3为10ul样品+490ul样品稀释缓冲液)
3、将标本2使用样品稀释缓冲液进行稀释10倍,20倍,50倍,标记为样品管4、5、6(样品管4为50ul样品+450ul样品稀释缓冲液,样品管5为25ul样品+475ul样品稀释缓冲液,样品管6为10ul样品+490ul样品稀释缓冲液)
三、预实验
1、取出2排孔板
2、在第1排孔板中加入100ul标准管1、2、3、4、5、6、7、8,在第2排孔板中加入100ul样品管1、2、3、4、5、6,使用微孔板振荡器进行混匀
3、用平皿密封器覆盖平皿,并在37℃孵育2小时
4、用稀释剂A将检测试剂A稀释100倍,并充分混合
5、取下盖子并丢弃液体,不洗板
6、将100 ul检测试剂A工作溶液等分至每个孔中。用平皿密封器覆盖平皿,并在37℃孵育1小时
7、取下盖子并丢弃溶液。用1X清洗缓冲液清洗板3次
8、用稀释剂B将检测试剂B稀释100倍,并充分混合
9、将100 ul检测试剂B工作溶液等分至每个孔中,密封平板,并在37℃下孵育1小时
10、取下盖子,丢弃溶液,清洗板5次
11、将90 ul TMB底物加入每个孔中,用板密封剂覆盖板,使用微孔板振荡器进行混匀,在37°C下遮光培养20分钟
12、每个孔加入50ul终止液
13、立即测量450nm处的吸光度
问:稀释了10倍、20倍、50倍,结果吸光度值都超出标准曲线范围,什么原因导致?
答:大概率是稀释倍数不够导致。
厂家给的答复:从我们对人类血清样本的测试来看,稀释率在0-1:128的范围内似乎适合这个试剂盒。根据这个范围稀释后结果仍不在标准曲线内
咱们技术给的答复:国内外的标本存在差异,建议稀释500-1000倍再实验看看结果
最终客户稀释1000倍在标准曲线内,保证了实验的顺利进行。