安诺伦代理Abbexa——人SH2B衔接蛋白1(SH2B1)ELISA试剂盒

Abbexa 是一家专门为生命科学、药物开发和生物技术领域提供生物工具的全球供应商。Abbexa 为科学界提供一抗、二抗、蛋白质、ELISA 试剂盒和酶以及其他专为研究而设计的试剂盒和工具，产品涵盖单克隆抗体、多克隆抗体、纯化蛋白质及生物试剂。

品牌优势：

1.产品量多时厂家提供的折扣力度大；

2.直邮产品，货期短；

3.厂家拥有专业的技术团队，他们随时可以帮助解决任何疑问，并热衷于提供答案和解决方案，24小时内回应问题，响应快，解决度百分百，可提供退／换货服务

具体案例分析：

试剂盒名称：Human SH2B Adaptor Protein 1 (SH2B1) ELISA Kit

货号：abx383165  

规格：96tests

存储温度：按试剂盒说明，标准品、96孔板及A、B液置于-20℃，其余产品置于2-8℃冰箱

此产品用于科学研究，研究目的：检测不同体重状态人群SH2B1水平，验证肥胖相关基因多态性与蛋白表达差异

实验流程：

一、标准品制备

1、离心标准品

2、取1000ul标准稀释缓冲液加入标准品中，充分混匀，静置10分钟，此为标准管1

3、在标准管2、3、4、5、6、7中加入标准稀释缓冲液500ul

4、从标准管1中取出500ul加入标准管2，充分混匀，从标准管2中取出500ul加入标准管3，依次进行梯度稀释

5、标准管8为空白对照，加入标准稀释缓冲液500ul

二、预实验样品制备

1、准备标本1、标本2

2、将标本1使用样品稀释缓冲液进行稀释10倍，20倍，50倍，标记为样品管1、2、3（样品管1为50ul样品+450ul样品稀释缓冲液，样品管2为25ul样品+475ul样品稀释缓冲液，样品管3为10ul样品+490ul样品稀释缓冲液）

3、将标本2使用样品稀释缓冲液进行稀释10倍，20倍，50倍，标记为样品管4、5、6（样品管4为50ul样品+450ul样品稀释缓冲液，样品管5为25ul样品+475ul样品稀释缓冲液，样品管6为10ul样品+490ul样品稀释缓冲液）

三、预实验

1、取出2排孔板

2、在第1排孔板中加入100ul标准管1、2、3、4、5、6、7、8，在第2排孔板中加入100ul样品管1、2、3、4、5、6，使用微孔板振荡器进行混匀

3、用平皿密封器覆盖平皿，并在37℃孵育2小时

4、用稀释剂A将检测试剂A稀释100倍，并充分混合

5、取下盖子并丢弃液体，不洗板

6、将100 ul检测试剂A工作溶液等分至每个孔中。用平皿密封器覆盖平皿，并在37℃孵育1小时

7、取下盖子并丢弃溶液。用1X清洗缓冲液清洗板3次

8、用稀释剂B将检测试剂B稀释100倍，并充分混合

9、将100 ul检测试剂B工作溶液等分至每个孔中，密封平板，并在37℃下孵育1小时

10、取下盖子，丢弃溶液，清洗板5次

11、将90 ul TMB底物加入每个孔中，用板密封剂覆盖板，使用微孔板振荡器进行混匀，在37°C下遮光培养20分钟

12、每个孔加入50ul终止液

13、立即测量450nm处的吸光度

问：稀释了10倍、20倍、50倍，结果吸光度值都超出标准曲线范围，什么原因导致？

答：大概率是稀释倍数不够导致。

厂家给的答复：从我们对人类血清样本的测试来看，稀释率在0-1：128的范围内似乎适合这个试剂盒。根据这个范围稀释后结果仍不在标准曲线内

咱们技术给的答复：国内外的标本存在差异，建议稀释500-1000倍再实验看看结果

最终客户稀释1000倍在标准曲线内，保证了实验的顺利进行。