在 PBS 中制作 4% 甲醛溶液（材料、步骤）

绝大多数 IHC/ICC 程序使用基于甲醛的固定剂固定组织和细胞。 下面的协议描述了在 PBS 中生成 4% 甲醛溶液的技术。

注意：甲醛是有毒的。 在使用之前，请仔细阅读 MSDS。 应戴手套和安全眼镜，并在通风橱内配制溶液。

所需试剂

• 去离子水

• 盐酸（稀释）

• 氢氧化钠 (1 N)

• 多聚甲醛粉

• 1X PBS：0.145 M NaCl、0.0027 M KCl、0.0081 M Na2HPO4、0.0015 M KH2PO4，pH 7.4

材料

• 过滤器单元

• 玻璃器皿和搅拌棒（甲醛溶液专用）

• 手套和眼睛保护

• 带磁力搅拌器的热板

• 温度计

• 通风罩

步骤

1. 对于 1 L 的 4% 甲醛，将 800 mL 的 1X PBS 添加到通风罩中搅拌板上的玻璃烧杯中。 边搅拌边加热至约 60 °C。 注意溶液不要沸腾。

2. 在加热的 PBS 溶液中加入 40 克多聚甲醛粉末。

3. 粉末不会立即溶解到溶液中。 通过从移液器中逐滴添加 1 N NaOH 来缓慢提高 pH 值，直到溶液变清。

4. 一旦多聚甲醛溶解，应将溶液冷却并过滤。

5. 使用 1X PBS 将溶液的体积调整到 1 L。

6. 重新检查 pH 值，并用少量稀 HCl 将其调整到大约 6.9。

7. 该溶液可分装并冷冻或在 2-8 °C 下保存长达一个月。