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10X单细胞转录组测序—细胞周期分析

2023-07-19 19:53 作者:alonlie  | 我要投稿

此文章可帮助你查看自己的数据受否受细胞周期的影响,并以降维图的形式清晰明了的展示。

文章中其中用到的文件获取方式https://pan.baidu.com/s/1HCsHRXNX9Il8u8RIPXSEug?pwd=2626

在进行单细胞分析时,由于细胞会处于各种细胞周期,此时不同类型地细胞可能因此表达相同细胞周期相关地基因,这些细胞周期相关基因会影响降维地效果,因此有必要进行细胞周期分析,将细胞周期相关地基因通过一定地方法回归掉,以此降低细胞周期相关基因对降维地影响。

10X单细胞转录组测序—常规流程

在我之前的文章中有包含细胞周期分析,甚至在刚开始的时候就已经将周期相关基因全部删掉了,在这里再做一个详细的介绍。

在进行完高变基因分析后,可将得到的seurat对象PBMC.all保存成PBMC.all2,用PBMC.all2进行以下分析,分析完再按照原文章中的流程继续分析。

首先进行一遍最普通的降维分析

细胞周期分析

由于我的样本是小鼠样本,基因名为小写格式,但seurat包里只提供了人类的大写的细胞周期基因,需要进行转化,这里你可以在文章开始处直接获取mouse_cell_cycle_genes.rds,然后进行周期分析。

查看细胞周期的分布

不出意外的话,不同周期会区分的很明显,且相关基因也会分布不均匀。

去除细胞周期的影响

去除后周期分布

不出意外的话会发现周期分布变均匀了,且基因的分布也会变均匀,但也会出现去除效果不好的现象,实属正常,不会有非常完美的去除效果,总会有瑕疵存在。若细胞周期基因不在研究范围内,可直接将细胞周期相关基因删掉。删除方法如下:

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