跑完电泳以后,转膜,封闭(杂磷酸化蛋白用TBST配制封闭液,其他可用PBST进行配制),根据蛋白大小对所需蛋白进行裁膜,杂一抗(我们lab是在4℃层析柜放摇床上过夜进行敷育),洗膜(5 min X 3),杂二抗(RT,45 min,放摇床上),洗膜,显影