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艾美捷Detroit R&D GDF-15癌症酶联免疫酶抑制剂试剂盒方案

2023-03-23 15:58 作者:认真搞科研的科研达人  | 我要投稿

患者血清中细胞因子GDF-15(也称为NAG-1或MIC-1)的水平在前列腺癌和骨癌的进展1,2。乳腺中的血清GDF-15(NAG-1/MIC-1)水平也增加,结直肠癌和胰腺癌转移患者。GDF-1(NAG-1/MIC-1)在结直肠中上调使用非甾体抗炎药和包括白藜芦醇、染料木素、二烯丙基二硫等饮食制剂治疗后的癌症细胞系和吲哚-3-甲醇2。Detroit R&D实验室最近的一项研究发现,GDF-15的联合测量与单纯PSA相比,PSA对诊断前列腺癌症更有效。GDF-15表达也是与心血管疾病相关。

 

每个试剂盒足以对多达24个样品进行一式三份的分析,并包含一个96孔板GDF-15

标准品、生物素化检测抗体和链亲和素偶联的辣根过氧化物酶(HRP),以及

用于稀释样品和抗体以及用于板洗涤的缓冲液。

 

Cat #GDF-15M:用于小鼠/大鼠GDF-15/NAG-1/MIC-1的兔多克隆抗体

Cat #GDF-15:人GDF-15/NAG-1/MIC-1的山羊多克隆抗体

 

艾美捷Detroit R&D GDF-15癌症酶联免疫酶抑制剂试剂盒化验程序:

步骤1:将100微升样品稀释缓冲液装入空白(BL)孔中。

步骤2:将每种标准品100微升装入适当的井中。

步骤3:将100微升的每个样品装入适当的孔中。

步骤4将培养皿在室温下培养两个小时。

步骤5:每孔用400微升稀释的洗涤缓冲液洗涤平板三次。

第6步:在三次洗涤循环的最后一次之后,将盘子拍干,放在纸巾上。

步骤7:将100微升检测抗体添加到除

BL井)。

步骤8:将平板在室温下培养2小时

步骤9:每孔用400微升稀释的洗涤缓冲液洗涤平板三次。

步骤10:将100微升的链霉亲和素HRP添加到除BL孔外的所有孔中

步骤11:将平板在室温下培养1小时

步骤12:每孔用400微升稀释的洗涤缓冲液洗涤平板三次。

步骤13:将200微升TMB添加到所有井中

步骤14:在室温下培养30分钟

步骤15:向所有井中加入50微升2N硫酸

步骤16:在450 nm处读取板

 

计算结果:

大多数读板器提供数据简化软件,可用于绘制标准曲线并确定样品浓度。如果您的读板器没有此选项,则可以使用数据缩减程序(4对数-对数曲线拟合的参数)。

如果您没有这些选项,可以按如下方式手动获取结果:

1.对空白处的吸光度读数进行平均,并从板的每个孔中减去该值,以获得校正后的读数。(注意:有些读板器会自动执行此操作。请参阅您的读板用户手册读者。)

2.平均每个标准品和空白品的校正吸光度读数。

3.通过绘制每个标准品(y轴)与标准品的平均净吸光度来创建标准曲线浓度(x轴;对数刻度)

4.使用回归分析生成的公式来计算未知样本的浓度。

5.将每个样品获得的浓度乘以其相应的稀释系数。

 

Detroit R&D专注于心血管疾病、癌症的研究,诊断和治疗领域。涉及环境健康科学、高血压、乳腺癌和前列腺癌相关研究领域。艾美捷科技是Detroit R&D的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。


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