PH敏感荧光探针（BCECF-AM；ANNA）

BCECF-AM——细胞内pH敏感荧光探针

BCECF-AM是一种对细胞内pH敏感的新型荧光探针，分别用490nm和440nm波长激发BCECF所得到的发射荧光之比与pH有很好的线性关系。BCECF-AM是乙酰甲酯化的BCECF，BCECF-AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料，BCECF-AM没有荧光，进入细胞后被细胞内的酯酶水解成BCECF，从而被留在细胞内。BCECF在适当的pH值情况下可以被激发形成绿色荧光。

图1.不同pH值下BCECF-AM荧光强度与激发波长的关系

图2.BCECF-AM激发形成绿色荧光

ANNA——荧光pH值敏感探针

ANNA是一个理想的比率型pH敏感探针，它的吸收和发射光谱在生理pH范围内（pH 6-8）随pH的改变发生可逆的变化，并且在酸性和碱性状态下都有很高的荧光量子产率，其pH响应不受偶联基团或材料影响。ANNA应用广泛，已成功用于固定细胞在不同pH环境中成像；活细胞内pH和肿瘤微环境体内外pH的监测。