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血清的主要作用及分类

2022-11-17 17:06 作者:Cas9X海星生物  | 我要投稿

由于血清来源于动物,且含有细胞培养中所需的各种营养(血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等),这奠定了血清是细胞培养实验中最普遍的试剂的基础。

胎牛血清功能及作用

牛血清是细胞培养中用量最大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必需的营养成分,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。

1. 提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。

2. 提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。

3. 有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。

4. 是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。

5. 起酸碱度缓冲液作用。

6. 提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。


血清,在血浆中除去纤维蛋白分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白已被除去的血浆。其主要作用:1. 血清提供:营养和能量来源;生长和粘附因子;肽和类固醇激素;载体蛋白。

2. 保护细胞:免受蛋白酶、毒性物质、PH值波动、机械剪切力、氧化及自由基的损伤。

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胎牛血清与新生牛血清、小牛血清区别

1. 血清类别

2.采血方式不同

胎牛血清:母牛怀孕3-8个月时,采用剖腹心脏密闭穿刺取血新生牛血清、小牛血清、供体牛血清:分别是取自新生牛(小牛)、成牛的血

3.血清成分不同

胎牛血清还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少;促细胞生长因子、促附因子、激素及其他活性物质等组分也不同于其他几类血清

4.用途不同

某些细胞的培养必须使用胎牛血清才行,如:干细胞、淋巴细胞、神经细胞、星状胶质细胞等;而有些细胞需要小牛血清就可以,如:肿瘤细胞等。使用浓度也不同,一般在10%-15%,有特殊要求的浓度在20%

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5.颜色不同

血清根据血红蛋白含量的不同,表现的颜色也不一样真正的胎牛血清凝血功能差,红细胞容易破裂,一般表现出微红色或橘红色;而新生牛(小牛)血清则表现为蜡黄色或偏黄色

6.澄清度和粘稠度不同

胎牛血清蛋白和脂类含量低,表现为稀薄、清淡新生牛(小牛)血清相比更加粘稠

7.血清选择

在这几类血清中,胎牛血清的品质无疑是最高的,如果你的细胞比较娇贵难养,出现比较好的培养效果请选择胎牛血清;如果你的细胞比较易养,给点什么血清都能出现很好的效果,使用新生牛(小牛)血清就足够了。

一般选择血清种类可以根据ATCC及实验需要来选择

根据加工工艺的不同进行区分

去外泌体血清

去除≥99%的胎牛血清内源外泌体,并与处理前的胎牛血清具有相同的细胞生长速率和形态。适用于收集细胞分泌的外泌体时使用。

透析血清

分子量小于10,000的分子如氨基酸、葡萄糖、盐离子和未结合的蛋白均被移除。透析血清主要用在进行营养成分优化和标定特定成分进行研究的实验中。

碳吸附血清

使用活性和右旋糖苷去除血清中的亲脂类(lipophilic)物质,如某些激素、细胞因子、生长因子等,去除作用对分子量大小并无区分。碳吸附胎牛血清常用于体外培养研究验证激素的作用效果。

低IgG血清

用于研究抗体、病毒和病毒反应、细胞表面抗原表位。

四环素调控胎牛血清

应用于使用敏感四环素诱导表达系统的细胞培养(Tet-on, Tet-off),以及其它对四环素敏感的实验中。

HI (热灭活)处理血清

血清热灭活是通过提高血清温度到56℃,并保持该温度30Min完成, 可以去除血清内补体,确保细胞与抗体结合不会发生裂解。加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,激活淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学研究中培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭活血清。

胚胎干细胞(ES)专用血清

是从多个批次的胎牛血清经过细胞培养及其他测试筛选出特定批号,适用于人及小鼠胚胎干细胞、成体干细胞及原代细胞长期培养。

间充质干细胞(MSC)专用血清

从多个批次的胎牛血清筛选出特定批号,经过骨髓,脂肪组织及脐带来源的间充质干细胞的细胞活性严格测试,通过传代及分化比例测试。

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按物种分类

马血清

10%马血清可代替FBS用于支持SRBC的体外抗体应答, 常与牛血清结合或单独作为哺乳动物细胞培养的补充培养基。

猪血清

猪血清在染色体研究中表现非常出色,可用于淋巴细胞培养, 疫苗生产(生产支原体), 中和脂质体包裹的腺相关病毒(AAV), 用于诱导大鼠肝纤维化, 作为酶联免疫吸附试验(ELISA)中的标准阴性参考。

兔血清

正常兔血清可作为免疫分析的阻断剂和对照。在免疫组织化学和免疫细胞化学方面,各种研究均采用20%或1:200稀释兔血清作为阻断剂。

羊血清

  • 用于生物医学研究的大多数细胞系和原代培养物上,FBS的合适替代物,病毒分离和鉴定,病毒学研究。

  • 用作鱼类细胞培养的有效NBCS替代物。

  • 可成功地代替胎牛血清在生长培养基中长期用于环孢蘑菇的体外繁殖。

鸡血清

适用于单抗研制、规模化培养的疫苗生产、生物医学研究和诊断试剂生产。

驴血清

适用于单抗研制、免疫组化、规模化培养的疫苗生产、生物医学研究和诊断试剂生产。

小鼠血清

小鼠血清采用健康小鼠血液为原料,经无菌采集、分离、微孔过滤后而成,性状为澄清液体,无噬菌体、低内毒素,无溶血无异物无细菌真菌支原体霉形体衣原体等,适用于试验室或生化科研相关试验,满足不同科研实验的多种需求。

血清保存方法

1.如何保存血清?

血清应该在-20℃保存。如果一次无法用完一瓶,应该无菌分装后冷冻保存。注意避免反复冻融。

2.为什么储存在冰箱中的血清会出现沉淀?

有些胎牛血清产品没有预老化,储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。这应该不会影响血清的质量。推荐在-20℃储存胎牛血清,避免反复冻融。

冻融方法

正确解冻方法:

将血清首先置于冰箱2-8℃中12-24小时,使之缓慢部分溶解,然后再放在室温下使之全溶。注意:溶解过程中要每隔一段时间缓慢地摇动血清使之混匀。切记:避免37℃水浴。

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