活化的血小板释放生长因子、细胞因子等活性物质，在创伤愈合过程中发挥重要作用，来源于血小板的外泌体（Extracellular vesicles, EVs）携带上述活性物质，有望成为治疗慢性伤口的潜在药物。

研究背景

伤口愈合延迟在健康个体身上很少发生，但对于罹患糖尿病、心血管病等疾病的患者，其基础疾病的存在促进了慢性伤口的形成。在伤口愈合过程中，血小板释放的生长因子、细胞因子等生物活性物质发挥了重要作用。由于这些生物活性物质同样存在于血小板EVs（platelet EVs, pEVs）中，将pEVs用于治疗慢性伤口成为可能。

研究内容

在本研究中，作者通过基于配体的外泌体亲和纯化（ligand-based exosome affinity purification, LEAP）制备临床级pEVs，并对其诱导伤口愈合的功能进行了验证。

实验结果

对分离获得的pEVs进行表征鉴定，分析其产量、粒径分布、形态及蛋白质含量等特征。结果显示，所得pEVs通过了无菌检测和内毒素检测，且表征结果与预期相符。

蛋白质谱分析结果显示，pEVs含有多种已知与伤口愈合有关的糖蛋白，此外，还鉴定出了在伤口愈合重塑阶段发挥重要作用的生长因子。

通过一系列细胞实验（迁移实验、增殖实验、血管生成实验等）评估pEVs在伤口愈合中的生物学活性，结果显示pEVs可被成纤维细胞（NHDFs）摄取，且经pEVs处理的成纤维细胞表现出显著的增殖活性。

用人真皮微血管内皮细胞（HDMECs）评估pEVs促进血管生成的潜力，结果显示，培养5天后pEVs处理的HDMECs形成细微的网状结构，提示pEVs可促进血管生成。

评估pEVs对重要细胞通路（Akt信号通路、ERK信号通路）的影响，结果显示，Akt磷酸化水平升高，ERK磷酸化水平升高，提示信号通路激活。

通过I期临床试验对pEVs的安全性进行评估，结果显示受试者均无严重不良事件发生，未观察到有临床意义的异常，创面均顺利愈合。

结论

研究表明，通过LEAP制备的临床级pEVs在细胞实验中表现出促进伤口愈合的治疗活性，I期临床试验证实了pEVs在治疗中的安全性，有望应用于慢性伤口的临床治疗。

Johnson J, Law SQK, Shojaee M, Hall AS, Bhuiyan S, Lim MBL, Silva A, Kong KJW, Schoppet M, Blyth C, Ranasinghe HN, Sejic N, Chuei MJ, Tatford OC, Cifuentes-Rius A, James PF, Tester A, Dixon I, Lichtfuss G. First-in-human clinical trial of allogeneic, platelet-derived extracellular vesicles as a potential therapeutic for delayed wound healing. J Extracell Vesicles. 2023 Jul;12(7):e12332. doi: 10.1002/jev2.12332. PMID: 37353884; PMCID: PMC10290200.