聚焦国自然热点-细胞焦亡，看完这篇知识点汇总，不愁没方向了

近几年，细胞焦亡（Pyroptosis）的研究热度迅猛上升，已成为国自然研究热点之一。

今天小薇带大家一起了解下细胞焦亡的机制和研究方法，请大家一定要耐心看完，文末有彩蛋哦！

01：定义

细胞焦亡是一种最新发现的炎症细胞程序性死亡方式，由炎性小体引发，表现为细胞不断胀大直至细胞膜破裂，导致细胞内容物的释放进而诱导炎症反应。

02：主要机制

细胞焦亡主要通过Gasdermin蛋白在细胞膜上成孔，导致细胞裂解死亡，而该蛋白需经过剪切活化才具备胞膜成孔能力。因此根据Gasdermin蛋白剪切分为经典的Caspase-1依赖性（图1左）和非Caspase-1依赖性途径（图1右）。这两种途径执行剪切的蛋白与诱发炎症的胞浆蛋白稍有差异，但最终都会导致促炎症细胞因子IL-1β和IL-18释放，诱发炎症。因此焦亡产生的主要信号分子包括：Caspase家族的部分蛋白，Gasdermin蛋白家族，炎症小体。

图1 细胞焦亡的主要机制

03：研究方法

1）电镜观察细胞形态：在细胞质膜破裂前，焦亡的细胞形成大量小泡，即焦亡小体。之后细胞膜上会形成孔隙，细胞膜破裂，内容物流出。

2）免疫荧光染色、免疫组化、Western等方法检测Gasdermin D (GSDMD)的切割。

3）q-PCR、Western Blot、免疫组化等方法检测炎性小体（如NLRP3、ASC）和Caspase（主要是Caspase-1，Caspase-4，Caspase-5，Caspase-11）的激活。

4）Western Blot和ELISA等方法检测IL-1β和IL-18前体的切割成熟和释放。

5）Tunel检测细胞死亡形态。

6）CCK8法测定细胞活力。

04：文献推荐

The p-STAT3/ANXA2 axis promotes caspase-1-mediated hepatocyte pyroptosis in non-alcoholic steatohepatitis.

发表杂志：Journal of Translational Medicine （IF：8.44）

研究目的：探讨膜联蛋白A2（ANXA2）在非酒精性脂肪性肝炎（NASH）肝细胞焦亡和肝纤维化中的作用及其分子机制。

设计思路：对小鼠肝组织和肝纤维化患者肝组织转录组数据进行生物信息学分析，筛选肝细胞焦亡相关差异基因（Anxa2）。建立小鼠体内NASH模型和体外NASH细胞模型，定量检测Anxa2/ANXA2的表达水平。然后通过ChIP-Seq对Anxa2上游转录因子进行筛选，并进行实验验证。通过体内外实验探讨p-STAT3/ANXA2轴对Caspase-1介导的焦亡和纤维化的影响。

结论: p-STAT3在转录水平上促进Anxa2的表达，从而激活Caspase-1介导的NASH肝细胞焦亡和纤维化，研究发现有助于更好地了解NASH的发病机制。

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