Biogradetech血浆/血清外泌体提取试剂盒使用方法说明
该试剂盒基于自主研发的磁珠,可在不吸附杂质的情况下特异性捕获外泌体,实现外泌体分离的高纯度和高回收率。它具有操作简单、纯度高、回收率高的优点,特别适合于从血浆和血清中分离外泌体。隔离的外泌体可用于WB分析、NTA或纳米流粒度分析、电子显微镜检测、组学研究、细胞和动物功能研究等等。 艾美捷血浆/血清外泌体提取试剂盒: 目录号:A-EXO006 尺寸:50T 储存:收到后,按照储存说明储存套件组件。保质期为12月。 血浆/血清外泌体提取试剂盒组成:
需要但未提供的材料: ·高速冷冻离心机 ·平台振动筛 ·1.5 mL离心管 ·磁选机架 ·超滤膜(MWCO 10kDa) 样品预处理: 1. 细胞去除:将样品在4℃下以300 g的速度离心5分钟,将上清液转移到一个新的离心管中。对于无细胞的样品,可以跳过这一步骤。 2. 细胞和细胞碎片去除:将样品在4℃下以2000 g的速度离心10分钟,将上清液转移到一个新的离心管中。 3. 大颗粒物去除:将从步骤2获得的上清液在4℃下以14000 g的速度离心30分钟,将上清液转移到一个新的离心管中。 富集外泌体: 1. 取500 μL预处理后的样品(如果处理的样品体积低于500 μL,只需使用溶液A将样品体积补至500 μL),加入10 mg(±10%变异)的ExoMag外泌体磁珠到一个1.5 mL的离心管中。将离心管固定在平台摇床上,在室温下以17 rpm的速度孵育30分钟。 2. 将上述离心管放在磁分离架上,静置5秒钟,倒掉上清液。 3. 加入1 mL溶液A,通过倒置离心管混合,将其放在磁分离架上静置5秒钟,倒掉上清液。 4. 重复步骤3两次,保留ExoMag外泌体磁珠。 分离外泌体: 1. 向ExoMag外泌体磁珠中加入100 μL洗脱缓冲液,涡旋30秒钟。将离心管固定在平台摇床上,在室温下以17 rpm的速度孵育30分钟。 2. 将离心管放在磁分离架上,静置5秒钟,将上清液转移到一个新的1.5 mL离心管中。这个上清液中含有外泌体。 外泌体不应长时间存放在洗脱缓冲液中。如果需要长期存储,请使用超滤管(分子量截留率10 kDa)用PBS溶液替换洗脱缓冲液。 该试剂仅用于科学研究领域,不适用于临床诊断或其他用途。