胰蛋白酶如何在细胞培养中发挥作用

什么是胰蛋白酶

胰蛋白酶是一种消化酶，可分解许多脊椎动物消化系统中的蛋白质。它存在于胰液中。胰蛋白酶切割肽羧基末端的赖氨酸和精氨酸残基。然而，当这两种氨基酸后面跟着果仁糖时，它不会切割它们。胰蛋白酶的活性用于许多生物技术过程，胰蛋白酶的作用称为胰蛋白酶消化或胰蛋白酶蛋白水解。胰蛋白酶的晶体结构如图1所示。

图1：胰蛋白酶

胰蛋白酶作用的最佳pH值为7.6-8.5。通常，在胰蛋白酶测定中使用酚红来监测上述pH范围。酚红在此pH范围内呈粉红色。胰蛋白酶测定在干冰上进行。

胰蛋白酶如何在细胞培养中发挥作用

质膜上的蛋白质负责多种功能，这些功能对于维持细胞的正常生理活动至关重要。一些质膜蛋白（如钙粘蛋白家族）是粘附蛋白，可作为锚，将细胞骨架蛋白连接到细胞外基质。这有助于细胞粘附和细胞迁移。质膜内的粘附蛋白如图2所示。

图2：细胞粘附蛋白

在细胞培养物中，可以将胰蛋白酶添加到培养基中，通过消化粘附蛋白从培养皿表面释放贴壁细胞。胰蛋白酶还通过消化粘附蛋白从聚集体中释放细胞。EDTA也与胰蛋白酶一起添加到细胞培养物中，以螯合培养基中的二价离子。钙和镁离子可能抑制胰蛋白酶的作用。最终，胰蛋白酶有助于从细胞培养物中获得单个细胞，促进细胞的下游处理。

结论

胰蛋白酶是一种消化肽的光解酶。胰蛋白酶广泛用于细胞培养，以获得单个细胞，因为胰蛋白酶消化粘附蛋白并将细胞释放到培养基中。