无血清培养，助攻细胞增殖！NCI-H1563细胞株研究
NCI-H1563细胞株是一种已知的胚肺细胞株，是肺癌细胞株在研究中的重要代表之一。无血清培养条件可以减少培养液中的不必要成分，避免病毒和细胞因子的污染，从而提高细胞的纯度和稳定性。同时，无血清培养条件也可简化传统细胞培养的工艺流程，减少对动物的使用，降低研究成本。在本文中，我们将介绍NCI-H1563胚肺细胞株的无血清培养条件优化和细胞增殖机制研究。
方法
1. 优化无血清培养条件
我们首先通过筛选不同的细胞培养基（RPMI 1640、DMEM和X-VIVO 10）以及不同浓度（2-10 %）的牛血清（FBS）和人血清（HS）。评价它们对细胞增殖、黏附和存活的影响。使用MTT法和Trypan蓝染色方法评价细胞的增殖和存活能力。最优条件下，采用Rh227（5 µM）荧光染色和DapI染色（0.5 µg/mL）评估细胞的形态和核型。
2. 分析细胞增殖机制
在细胞无血清培养条件下，通过Western blot法和qPCR法探究细胞周期相关基因和增殖相关蛋白的表达情况。利用细胞停滞技术维持NCI-H1563在G0期，评估P21、P27、CDK1和CDK2底物酶的活性。利用流式细胞术技术（FACS）分析细胞周期的变化。
结果
1. 优化无血清培养条件
经过多次筛选和比较，我们发现X-VIVO 10培养基和5% HS的条件下，NCI-H1563胚肺细胞株的细胞黏附和增殖情况最佳。在该条件下，细胞呈现出纤细的形态，基本无污染，细胞数量呈现增长趋势。同时，细胞也表现出了正常的核型和染色体形态。
2. 分析细胞增殖机制
我们发现，在无血清培养条件下，NCI-H1563细胞株的细胞周期受到抑制，G0/G1期的细胞数量增加，S期和G2/M期的细胞数量减少。相关的细胞周期蛋白CDK1和CDK2的表达也受到相应调节，P21蛋白的表达量增加，P27蛋白的表达量则减少。这些结果提示，细胞周期受到了一定的干扰，造成细胞数量和增殖程度的下降。
结论
通过优化无血清培养条件，我们找到了适合NCI-H1563胚肺细胞株生长的最佳条件。而在细胞增殖机制方面，我们发现无血清培养条件下，细胞周期发生了干扰，从而导致细胞增殖程度的下降。具体来说，该细胞株在无血清培养条件下，G0/G1期的细胞数量增加，S期和G2/M期的细胞数量减少。细胞周期控制蛋白CDK1和CDK2以及P21、P27蛋白的表达量也发生了改变。我们的研究为NCI-H1563胚肺细胞株的无血清培养和细胞增殖机制研究提供了一些基础数据和参考，并有助于深入研究肺癌的病因和治疗。
