不同类型乙醇的选择

分子生物学中使用的 3 个乙醇等级

乙醇在微生物学中有多种用途。它用于生物分子的纯化和沉淀、组织学中的染色和复染标本、包埋前的组织脱水和消毒。实验室常用的乙醇分为三个等级。

1) 95% (95.6%) 乙醇

这是您可以通过蒸馏获得的最高浓度乙醇，因为 95.6% 的乙醇是一种共沸物，这意味着蒸汽状态的乙醇与水的比例与液态相同。

2) 无水 (99–100%) 乙醇

一些对水的存在敏感的程序需要无水乙醇。生产浓度高于 95% 的乙醇的常用方法是使用添加剂来破坏共沸物的组成并允许进一步蒸馏。因此，无水乙醇有时会含有微量的这些添加剂（如苯）。

3) 变性乙醇

工业乙醇（95% 或无水乙醇）含有添加剂（如甲醇和异丙醇）这是您最有可能在实验室中用于消毒的级别。

用于分子生物学的乙醇

沉淀核酸时不应使用工业乙醇，因为某些添加剂会干扰下游应用。 这有点难以预测，因为添加剂因生产商而异，但最安全的做法是完全避免使用工业乙醇。可以使用 95% 或 100% 的非变性乙醇，但在处理荧光标记的核酸时，我不使用无水乙醇，以避免残留苯产生背景荧光。

消毒用乙醇

除了成本上的巨大差异外，使用哪种乙醇等级进行消毒并不重要，因此大多数实验室都使用变性原液。重要的是最终乙醇浓度。浓度在 70% 到 90% 之间的乙醇是一种有效的消毒剂。因为 90% 的乙醇会凝固蛋白质，而形成的蛋白质层有效地使细胞处于休眠状态。

然而，在 70% 的浓度下，乙醇需要更长的时间才能蒸发，而这种更长的接触时间意味着它能够更有效地穿透细胞。 70% 级的水对于使蛋白质变性也很重要。而且 70% 的乙醇也往往更便宜且不易燃 。