艾美捷质膜H+ATP酶应用实例和文献参考
质膜H+ATP酶是约100kDa的蛋白质家族，据信其不包括植物和真菌的质膜。该蛋白质锚定在生物膜内，其产生用作能源的电化学梯度，并且对于摄取大多数代谢物和植物对环境的响应（例如叶子的移动）是必需的。
艾美捷质膜H+ATP酶基本参数：
中文名称：H + ATPase |等离子膜H + ATPase（兔抗体）
英文名字：H+ATPase | Plasma membrane H+ATPase (rabbit antibody)
规格：50ul
应用类型：Immunofluorescence (IF), Immunolocalization (IL), Western blot (WB)
来源宿主：兔
免疫原：KLH标记合成肽，衍生自可用的di和单子叶植物，蕨类植物，苔藓和藻类质膜ATPase格式：冻干
保存建议：在-20°C下储存冻干/重构；一旦重构，制作等分试样以避免反复的冻融循环。请记住，在打开管子之前先旋转管子，以避免粘附在管子盖子或侧面的材料可能造成的任何损失。不要将此抗体储存在4°C。
推荐稀释度：1:600-1:1000（IF），1:100（IL），1:1000-1:10000（WB）
艾美捷质膜H+ATP酶应用实例：
图2：质膜H+ATP酶在拟南芥根中的定位。拟南芥，延伸区，H+ATP酶（绿色）。将拟南芥根在多聚甲醛中固定30分钟。组织在免疫定位之前进行清洁。抗兔H+ATPase |质膜一抗稀释于1:300和与Alexa 555偶联的抗兔IgG二抗。与DAPI可视化核共染色（蓝色）。比例尺–100μm。图1：来自拟南芥（1），大麦（2），玉米（3），烟草质膜部分的20μg总蛋白，2.5μg（4） ，用蛋白质提取缓冲液，PEB（AS08 300，用3至5体积的均质缓冲液），在70°C下变性10分钟，并在4-12%NuPage（Invitrogen）LDS-PAGE上分离，并印迹1h至PVDF。在20mm Tris，137mm氯化钠ph7.6,0.1%（v/v）的封闭试剂中转移后立即封闭斑点Tween-20（TBS-T）在室温下搅拌1小时。Blots在一级抗体中以1:5000的稀释度在室温下孵育1h温度搅拌。倾析出抗体溶液并将印迹短暂冲洗两次，然后洗涤一次15分钟和3次在室温下在TBS-T中搅拌5分钟。用二级抗体（抗兔IgG辣根过氧化物酶）孵育小鼠偶联的推荐二抗AS09 602）在2%封闭溶液中于室温搅拌稀释至1:20 000，持续1h。如上洗涤印迹，并根据制造商的说明用化学发光检测试剂显色5分钟。使用CCD成像仪（FluorSMax，Bio-Rad）和Quantity One软件（Bio-Rad）获得印迹的图像。曝光时间为2分钟。
艾美捷质膜H+ATP酶文献参考：
Michalopoulou et al. (2022) The host exocyst complex is targeted by a conserved bacterial type-III effector that promotes virulence. Plant Cell. 2022 May 30:koac162. doi: 10.1093/plcell/koac162. Epub ahead of print. PMID:35640532.
Hofmann, Wienkoop & Luthje (2022) Hypoxia-Induced Aquaporins and Regulation of Redox Homeostasis by a Trans-Plasma Membrane Electron Transport System in Maize Roots. Antioxidants (Basel). 2022 Apr 25;11(5):836. doi:10.3390/antiox11050836. PMID: 35624700; PMCID: PMC9137787.
Huang et al (2021). Parasitic modulation of host development by ubiquitin-independent protein degradation. Cell. 2021 Sep 30;184(20):5201-5214.e12. doi: 10.1016/j.cell.2021.08.029. Epub 2021 Sep 17. PMID: 34536345; PMCID: PMC8525514.
Lapshin et al. (2021) Sterol Extraction from Isolated Plant Plasma Membrane Vesicles Affects H+-ATPase Activity and H+-Transport. Biomolecules. 2021 Dec 16;11(12):1891. doi: 10.3390/biom11121891. PMID: 34944535; PMCID: PMC8699270.
Choi et al. (2021) Augmented CO2 tolerance by expressing a single H+-pump enables microalgal valorization of industrial flue gas. Nat Commun. 2021 Oct 18;12(1):6049. doi: 10.1038/s41467-021-26325-5. PMID: 34663809; PMCID: PMC8523702.
