微生物限度检查法灭菌和培养温度

　　微生物限度检查法

　　微生物限度检查在环境的洁净度10000级和局部100级的单向流空气区域内进行，其全过程应严格遵守无菌操作，以防再污染。单向流空气区域、工作台面及环境必须定期按国家《医药工业洁净室(区)悬浮粒子、浮游菌和沉降菌测试方法》现行标准进行洁净度验证。隔离系统按相关的要求进行验证，其内部环境的洁净度须符合无菌检查的要求。

　　灭菌和培养温度 ：

　　细菌培养温度为30～35℃;

　　霉菌、酵母菌培养温度为23～28℃;

　　控制菌培养温度为35～37℃

　　检验量：

　　检验量 指供试品一次检验的用量。一般为10g或10ml;化学药膜剂为100cm2;贵重或微量包装的药品可酌减〔不得少于3g〕。检查沙门菌的供试品其检验量增加10g或10ml。

　　一般随机抽样不少于检验用量〔2个以上最小包装〕的3倍量。

　　供试液的制备 ：

　　用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液制备供试液或选用适宜的乳化剂、分散剂、中和剂制备供试液;其用量应验证，在该检验条件无抗菌作用。供试液制备妥后不得超过1h就加入检验用培养基

　　具抑菌活性的供试品

　　当供试品具有抑菌活性时，应将供试液中的抑菌活性消除后，方能依法检查。常用的方法有：

　　⏹稀释法——降低供试品的相对浓度

　　⏹薄膜法——利用体积差异别离

　　⏹中和法——利用化学〔生物〕专属性灭活

　　⏹离心法——利用沉降系数差异别离