高中生物基础知识单-第四章物质鉴定试验部分
四、物质鉴定实验
1、还原糖检验注意事项
还原性糖具有醛基,如葡萄糖、果糖、麦芽糖等,鉴定时可以用斐林试剂(现配现用)或班氏试剂(无需先配现用),颜色先为蓝色(物质是氢氧化铜),再为棕色(物质是氢氧化亚铜),最后生成砖红色沉淀(物质是氧化亚铜)。不能用西瓜做材料的原因:西瓜的细胞液是红色的,对实验结果有遮蔽作用。斐林试剂构成是质量浓度为0.1g/mL氢氧化钠溶液和0.05g/mL硫酸铜溶液,使用特点是混合使用,现配现用,水浴加热。斐林试剂鉴定的实验原理是氢氧化铜与醛基反应。
2、脂肪检验注意事项
鉴定脂肪用的是苏丹Ⅲ染液或苏丹Ⅳ染液,前者染色3min,后者染色1min,前者为橙黄色,后者是红色,滴3-4滴,用吸水纸吸取染液再滴加体积分数为50%酒精溶液,目的是洗去浮色。
3、蛋白质鉴定注意事项
鉴定蛋白质用双缩脲试剂。双缩脲A液为质量浓度为0.1g/mL氢氧化钠溶液,滴加1mL,双缩脲B液为质量浓度为0.01g/mL硫酸铜溶液,滴加3-4滴,不能滴加过多,原因是氢氧化铜显蓝色,对实验有遮蔽作用。双缩脲试剂鉴定蛋白质的实质是,铜离子在碱性条件下和肽键反应紫色络合物。若用蛋清做实验,必须稀释,否则蛋清会粘在内壁上难以清洗。


