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安诺伦代理Lumiprobe——ProteOrange蛋白质定量试剂盒

2023-10-23 17:35 作者:生物课代表小安  | 我要投稿

自 2006 年以来,Lumiprobe生产和销售用于生命科学研究和诊断的先进化学品。产品目录包括荧光染料、用于寡核苷酸合成的亚磷酰胺、点击化学品和其他试剂。

ProteOrange 蛋白质定量试剂盒

使用荧光染料的 ProteOrange 试剂盒可实现比分光光度法和其他用于蛋白质定量的传统方法(Lowry、Bradford、BCA)更高的灵敏度进行蛋白质定量。

ProteOrange 试剂是试剂盒的关键成分,其游离形式几乎不显示荧光。在溶液中,它与蛋白质分子形成复合物,并在与蛋白质结合后表现出增强的荧光。ProteOrange 与蛋白质复合物中的激发最大值为 ~485 nm,发射最大值为 ~590 nm。该试剂盒可与任何具有合适激发源和检测通道的荧光计一起使用。一般来说,测量蛋白质浓度的工作范围受到设备灵敏度的限制。对于比色皿荧光计,建议的可测量浓度范围为 10 ng/mL 至 10 µg/mL;对于平板荧光计,建议的可测量浓度范围为 100 ng/mL 至 10 µg/mL。

该试剂盒包含 ProteOrange 荧光染料、用于制备染料工作溶液的缓冲液和蛋白质浓度标准品(BSA,2 mg/mL)。为了定量测试蛋白质,制备染料工作溶液并用它稀释测试样品和已知蛋白质浓度的样品以生成校准曲线。使用试剂盒中的牛血清白蛋白或与测试样品中相同的实验蛋白(如果有)制备蛋白质浓度标准品。将准备好的样品在 95 °C 下孵育 10 分钟以使蛋白质变性,让其冷却至室温并测量荧光强度。

根据样品体积的不同,测量次数从 200(标准荧光比色皿的样品体积 2.5 mL 和测定体积 2 mL)到 2000(96 孔板的样品体积 250 µL 和测定体积 200 µL)不等。

 

 

 


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