冷冻电镜技术
在不需要对样品进行结晶、纯度要求相对较低的状态下,在原子分辨率水平成为结构生物学当下利器。
在表观遗传学研究领域,冷冻电镜被应用到染色质重塑复合物、组蛋白修饰复合物和染色质结构蛋白解析方面。这些数量众多、分子量巨大和高度动态变化的复合物,几乎很难采用结晶方法进行解析。例如,INO80 复合物,2013年利用冷冻电镜解析,发现酿酒酵母INO80含有15个亚基,呈延伸的胚胎状结构,看起来象用一只手抓住核小体、三面包围结合于核小体。
在染色质结构方面,采用冷冻电镜深入研究了30 nm染色质纤维结构,结果显示在体外组装过程中,H1组蛋白介导形成染色质纤维成左手螺旋结构,4个核小体形成一个结构单元,4聚核小体之间间隙可能是表观修饰作用空间。