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每日科研进展l2022.06.29lRNAi沉默BtPPO1基因提高烟粉虱获取和保留番茄褪绿病毒的能力

2023-08-07 10:45 作者:RNA生物农药  | 我要投稿


RNAi沉默BtPPO1基因能够提高烟粉虱获取和保留番茄褪绿病毒的能力

番茄褪绿病毒(ToCV)严重影响了世界各地的番茄生产。ToCV由世界上一种严重的农业害虫烟粉虱(Bemisia tabaci)半持续传播。然而,ToCV与其烟粉虱载体之间的相互作用机制仍知之甚少。

该研究之前的转录组分析表明,在获得ToCV后,烟粉虱中一个免疫相关基因酚氧化酶prophenoloxidasePPO)的表达水平增加,这表明PPO可能参与了ToCV与其载体之间的相互作用机制。

为了确定PPO在烟粉虱获取和保留ToCV中的作用,克隆了BtPPOBtPPO1BtPPO2)的完整开放阅读框(ORF),然后进行了结构和系统发育分析。BtPPOs与半翅目昆虫的PPO基因密切相关。

图 1. BtPPOs基因的序列及系统进化树分析

逆转录定量PCRRT-qPCR)检测BtPPOs的时空表达,表明BtPPOs在所有组织和发育阶段均有表达。

图 2. BtPPOs基因的时空表达分析

同时也发现,只有BtPPO1在烟粉虱获得ToCV 1224小时后显著上调。

图 3. BtPPOs基因受到ToCV感染后的诱导效果分析

根据石蜡荧光探针荧光原位杂交(FISH)实验,证实ToCVBtPPO1共定位于烟粉虱的胸部,这进一步揭示了它们相互作用的位置。


图 4. BtPPO1与ToCV共定位分析

最后,利用RNA干扰(RNAi)技术研究了BtPPOs对烟粉虱ToCV获取和保留的影响。结果表明,RNAi基因BtPPO1后,显著提高了烟草花叶病毒的滴度。

图 5. BtPPOs基因RNAi效率分析

            

  图 6. RNAi抑制BtPPOs后,感染ToCV病毒滴度分析

这些结果表明,BtPPO1参与了烟粉虱对ToCV的获取和保留。

原文链接:

https://doi.org/10.3390/ijms23126541


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