“核酸检测”这一词在今年深入人心，但究竟什么是核酸检测，检测原理，检测目标是什么？下面，我就简单介绍一下核酸检测。

在疫情期间，最早出现，也是目前最有效的新型冠状病毒检测方式便是核酸检测

——PCR检测（RT-PCR检测）

PCR技术用于扩增特定序列的DNA片段,也就是只能以DNA为模板复制出一模一样的DNA

但众所周知，冠状病毒是单链RNA病毒，所以常规PCR不能扩增。于是RT-PCR技术成为首选。

RT-PCR与常规的不同之处仅在于，在第一步要先将单链RNA转cDNA（没什么卵用的互补DNA），简称RT，再进行PCR。RT与PCR步骤类似，但要求更加严格，此处不多赘述。

这里有朋友就会问了，你说了PCR是扩增，但到底咋检测核酸啊？

这里举出两种最常规PCR检测方法——荧光PCR

一、Taqman水解探针法

（虽然更精准，但核酸检测不用...太贵了，费时间）

备注：圈R和圈Q连成的线段表示Taqman探针，探针断裂（水解）发出荧光，反之无

           圈R表示报告基团暨发出荧光的基团，圈Q表示淬灭基团暨阻止发出荧光的基团，当RQ连接时无荧光，反之有

首先，收集到样本之后不能直接用PCR+探针检测，因为样本数量过少，所以要先常规扩增。

PCR分为三步：变性、退火、延伸

变性：将双螺旋结构的DNA完全展开，并形成DNA单链

不解旋就如同下面的钢绳一样，根本无法复制。

退火：放入引物（一小段已知序列DNA，由于某些化学原因，DNA无法凭空形成一条链，具体原因可自行搜索，点个赞下期接着讲DNA复制 :D ）

延伸：在DNA聚合酶的作用下，形成互补的一条完整的双螺旋DNA

这样，你就会得到双倍的快乐DNA

以上步骤是一个循环，重复上述步骤几十次才能达到检测浓度。

检测的步骤如图所示，与常规PCR一样，只不过加了一条探针（也就是一段与已知序列互补的DNA链）。

由于DNA复制单链的时候，复制过程必须完整，所以DNA聚合酶就会把在它前进方向挡路的探针切碎水解，于是乎报告基团与淬灭基团分离，报告基团就发出了bulinbulin的亮光。

于是，检测仪检测到荧光就得出阳性，反之是阴性。

二、荧光染料法

（核酸检测用这个，但是某些情况不如探针精准...毕竟简单快捷哇）

核酸荧光染料在游离时几乎不发光，但与DNA结合后发光，由此可以检测

在一般情况下，由于荧光染料自身的物理性质，它能结合DNA某个特定的位置，但是并不能特异性识别DNA片段

说人话就是，只能检测DNA的有无

以冠状病毒核算检测为例，在提取病毒的RNA的时候，若不小心掺杂了DNA，就有可能造成假阳性（虽然正常不会:D）

在确保了提取RNA的纯度之后，通过前文提到的RT-PCR过程，通过检测仪看bulinbulin的光强，就可以确定 阴性/阳性 了

end 

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