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植物组织培养常用的抗生素及使用说明指南

2023-07-14 15:44 作者:达则兼济天下  | 我要投稿

植物组织培养是一种将植物的细胞、组织或器官在无菌条件下培养和繁殖的技术。它通常使用人工制备的培养基,提供适当的养分和生长条件,以促进植物细胞的增殖和分化。

植物组织培养可以通过以下几种方式进行:

胚培养:将植物胚或种子表面消毒后,培养在含有适当激素和营养物质的培养基上,促使其发育成植株。

分生组织培养:从植物茎、叶、根等部位中取出细胞组织,将其培养在含有激素和营养物质的培养基上,通过细胞分裂和分化形成新的植株。

愈伤组织培养:通过创伤或外界因素,如伤口、组织切片或激素添加,诱导植物细胞产生愈伤组织,然后将愈伤组织进行培养,进一步分化为新的植株。

植物组织培养过程中,会用到很多种抗生素,那么又该怎么去选择合适的抗生素和使用呢?下面就对几种常会用到的抗生素一一说明:

制霉菌素
制霉菌素是由链霉菌产生的一种抗真菌剂。其悬浮液具有杀菌和抑菌活性。制霉菌素只能微溶于水和乙醇。通过在少量二甲基亚砜(DMSO)中对粉末进行表面除菌(以湿润粉末),然后用无菌水,将粉末悬浮,来制备无菌悬浮液。该操作应在无菌条件下使用无菌设备(玻璃器皿等)进行。
制霉菌素制剂不耐热。水悬浮液应在 -0°C 下避光储存。制霉菌素悬浮液的 pH 约为 6.5-8.0,在 pH 低于 2.0 或高于 9.0 下会分解。

羧苄青霉素钠
羧苄青霉素是一种白色至灰白色的吸湿性粉末,溶于水和乙醇。羧苄青霉素对革兰氏阴性菌最有效,对革兰氏阳性菌也有一定的作用。据报道,羧苄青霉素水溶液在室温下可稳定 24 小时,在 0-5°C 下可稳定 72 小时。

头孢噻肟钠
头孢噻肟是一种白色至灰白色粉末,易溶于水。新制备溶液的颜色变化不一定表示效价的变化。本品需避光存储于密闭容器中。头孢噻肟水溶液 0-5°C 存储时,pH 保持在 4.3-6.2,保持 14-21 天。头孢噻肟对革兰氏阴性菌非常有效。

G-418 硫酸盐
虽然 G-418 硫酸盐与庆大霉素有关,但通常不作为标准抗生素使用。它通常用于分子生物学中的筛选。G-418 硫酸盐对细菌、酵母、原生动物、蠕虫和哺乳动物细胞来说有毒。抗药性是由两个细菌起源的显性基因中的一个产生的,这些基因可以在真核细胞中表达。
G418 硫酸盐是水溶性的,可在室温下储存 1 年。其水溶液应冷冻保存。选择所需的 G418 硫酸盐的量将随细胞类型和生长周期的不同而变化。虽然相比非扩增阶段的细胞,生长期的细胞对 G418 的反应更迅速,但是处于对数期的细胞仍然需要 3-7 天来进行筛选。

潮霉素 B
湿霉素 B 是一种氨基糖苷类抗生素,对原核、真核的微生物和细胞均有效。与 G418 硫酸氢盐一样,通常用于分子生物学中的筛选。昆虫和哺乳动物细胞可以表达 hph 基因,该编码了潮霉素-B-磷酸转移酶,抗湿霉素 B。湿霉素 B 呈粉末状,用于抗生素筛选时,推荐使用浓度为 10-400 µg/ml。

抗生素参考指南

XX:对大多数物种有效
X:对某些物种有效
CC=愈伤组织培养;PR=植株再生;EC=子叶、下胚轴或叶盘培养;TS=转化选择;SE=体胚胎发生;SSC=茎选择培养;PC=原生质体培养;TEC=块茎外植体培养;STM=茎尖微繁殖

以上就是今天AbMole生物带给大家的科普内容了,希望对植物专业的科研用户能有所帮助。

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