植物干细胞培养技术

1、主要用于木本植物形成层干细胞的获得

以植物的新生枝条为外植体，表面灭菌后剥离木质部获得含有形成层、韧皮部、皮质和表皮的组织，在分离培养基上培养，培养 30 d 后，新生的形成层干细胞与脱分化的愈伤组织分离，将获得的形成层干细胞转移到生长培养基上培养。本方法可被应用于多数木本植物。目前，红豆杉和银杏已经成功建立了该类干细胞培养体系。

2、主要用于草本植物储藏根形成层干细胞的获得

通过对主根进行消毒灭菌，获得含有形成层的无菌薄片并进行高渗处理，使分化组织皮层、韧皮部、木质部、髓部等)失去活性，仅保留形成层的活力。转移至诱导培养基中培养至有细胞长出,然后将外植体继代到生长培养基，培养 10~20 d 后即可分离得到形成层干细胞，所得干细胞在同样的培养基上继代培养。本方法可被应用于大部分具有储藏根的草本植物，如轮叶党参、羌活、桔梗、野葛等。目前，人参已经成功建立了该类干细胞培养体系。

3、主要应用于植物根部静止中心干细胞的获得

收集无菌苗含有静止中心的根组织,去掉根冠从切口开始截取 1 mm 长作为外植体，将外植体放入诱导培养基，培养 30 后，静止中心干细胞由于与其他根部组织细胞的不同，两者自然分离，将获得的静止中心干细胞转移到生长培养基培养。目前，利用该方法可得到一年生活多年生草本药用植物的干细胞系。