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高效检测——艾美捷PKA激酶活性检测方案

2023-02-03 15:30 作者:艾美捷  | 我要投稿

激酶背景:

1968年,化学家H. Fischer和Edwin G. Krebs发现了蛋白激酶A,更确切地说是腺苷3’, 5’-单磷酸(环AMP)依赖性蛋白激酶。他们因在磷酸化和去磷酸化以及它与蛋白激酶A活性的关系方面的工作而获得了1992年的诺贝尔生理学或医学奖。

 

PKA是研究得最广泛的蛋白激酶之一,部分原因在于它的独特性;在组成人类激酶组(kinome)的540个不同的蛋白激酶基因中,只有一个其他的蛋白激酶,酪蛋白激酶2,已知在生理条件下以四聚体形式的存在。

 

哺乳动物PKA亚基的多样性是在Stan Knight博士和其他人鉴定出可能的四个C亚基基因和四个R亚基基因之后被意识到的。1991年,Susan Taylor等人结晶了PKA Cα亚基,首次揭示了蛋白激酶核心的双叶结构,为基因组中所有其它蛋白激酶(“激酶组”)提供了蓝图。

 

已发现的蛋白激酶约有400多种,分子内都存在一个同源的由约270氨基酸残基构成的催化结构区。在细胞信号传导、细胞周期调控等系统中,蛋白激酶形成了纵横交错的网络。这类酶催化从ATP转移出磷酸并共价结合到特定蛋白质分子中某些丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸残基的羟基上,从而改变蛋白质、酶的构象和活性。

 

艾美捷PKA激酶活性试剂盒(ADI-EKS-390A)是一种高效的检测方法,使用很少的样品量。该试剂盒使您能够在方便的基于 96 孔板的检测中读取终点或动力学检测,并提供简单的样品处理方案。该测定还提供高信噪比。

图:用EKS-390A分析纯化的活性PKA活性。使用PKA基质微量滴定板测定不同数量的纯化活性PKA。试验在300℃下孵育60分钟

 

PKA激酶活性试剂盒(ADI-EKS-390A)参数

替代名称: 蛋白激酶A,cAMP依赖性蛋白激酶

应用: 比色检测

活性测定

应用说明: 用于定量测定任何物种的部分纯化、纯化或粗酶制剂中的PKA激酶活性。

物种反应性: 物种独立

使用/稳定性: 将所有组分储存在 4°C,活性激酶在 -80°C 下储存。

航运: 用干冰运输

内容: 微量滴定板、抗体、偶联物、抗体稀释缓冲液、激酶测定稀释缓冲液、ATP、活性激酶、洗涤缓冲液浓缩液、TMB 底物、终止液 2

 

PKA激酶活性试剂盒部分文献:

神经炎症介导的线粒体失调涉及术后认知功能障碍:Y.自由拉迪克。生物学 178, 134 (2022);

蛋白激酶C(PKC)-θ核易位的选择性靶向可减少间充质基因特征并重振免疫治疗耐药性和转移性癌症中功能失调的CD8 + T细胞:J. Dunn等人;癌症 14, 1596 (2022);

佛司可林通过TLR4作用在体外调节视网膜内皮细胞通透性:L. Liu, et al.;摩尔细胞。生化。476, 4487 (2021);

罗氟司特改善淀粉样蛋白发生和taupath小鼠模型中的认知缺陷:参与一氧化氮状态,Aβ挤出转运蛋白ABCB1,以及PKA抑制剂H89逆转:N.H. Ashour等人;神经精神药理学。生物学精神病学111,110366(2021);

cAMP/PKA/CREB 通路和β-阻滞蛋白 1 在妊娠大鼠 LH 诱导黄体溶解中的作用:A. Vashishta等;复制 162, 21 (2021);


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