重复悬吊应激致小鼠性行为缺损模型【疾病动物模型】

重复悬吊应激致小鼠性行为缺损模型【疾病动物模型】

【造模机制】应激是在内外环境剧变的刺散下,机体出现的在精神、神经、内分泌和免疫等方面的综合应答状态,可引起生殖内分泌功能障碍,表现为睾丸分泌睾酮水平的下降,性行为缺损。悬吊应激方法是以动物尾部为支点将其悬吊于水面上,造成动物身体和心理应激。动物接受同种应激源一定时间后可产生耐受性,通过延长悬吊时间可增加应激强度,避冤色动物产生耐受现象。

【造模方法】1.动物和试剂雄性昆明小鼠,体重 25～30g,绳子,水槽,温度计等。2.模型制备小鼠以尾部为支点将其悬吊于水面上,以前肢刚接触水面为准,水温(20±2)℃,每日 1 次,连续 10 天,并逐渐延长应数时间:第 1~3 天悬吊 2 小时,第 4～6 天悬吊3小时,第7~5 天悬吊 4 小时,第 10~11 天悬吊 5 小时,悬吊时间为 9:00～14:00。每次解除悬吊后 10 分钟给药,连续 15～30 天。悬吊第10 天开始,将雄性小鼠放入单只饲养的动情期雌性小鼠笼中。3.样本采集和观察指标观察记录 20 分钟内如下性行为:舔,跨骑和交配的发生数、发生率及跨骑潜伏期,并取血测定血浆皮质酮和睾酮水平。亦可取雌性小鼠与雄性小鼠合笼(雌*雄=3：1),置于暗室内观察,记录合笼至第 1 次交配的时间(交配潜伏期)及 20 分钟内交配次数。

【模型特点】重复悬吊应激 5天,小鼠性行为开始下降,重复应激 10 天,小鼠性行为明显减低,表现为舔、跨骑和交配数明显减少,跨骑潜伏期显著延长,跨骑和交配率明显降低。血浆皮质酮明显增高,而睾酮水平显著降低。

【应用范围】用悬吊应激模型,小鼠连续应激 10 天,并循环增加应激强度,每次应激前30 分钟,服用待测药物,观察待测药物对应激性性行为低下的保护作用。结果表明,应激模型组小鼠性行为明显减少,甚至达到缺损的程度,同时血浆睾酮水平明显降低。

【注意事项】悬吊时小鼠间应有一定的距离,以免小鼠相互攀爬,同时应注意小鼠自身的攀爬。

【模型评价】机体重复接触同种性质同种强度的应激原,会对其产生耐受性,但不同应激原之间无交叉耐受性,而且耐受性出现的快慢和应激原的性质,强度和接触的频率密切相关,应激强度越大,产生耐受性所需要的时间就越长。根据这一性质,本文循环增加应激强度,即延长应激时间,使机体始终处于对应激原敏感状态即高水平皮质酮状态,以造成应激性损伤模型。

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