单蛋白修饰鉴定
蛋白质的不同氨基酸位点可以在相关酶的作用下共价结合不同的官能基团进行多种翻译后修饰,包括磷酸化、糖基化、泛素化、亚硝基化、甲基化和乙酰化等,这些翻译后修饰大大丰富了蛋白质的生物学功能。单蛋白修饰鉴定就是指对单个蛋白质进行翻译后修饰鉴定,包括修饰类型、修饰位点以及对修饰的含量等进行鉴定。
液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)技术是进行蛋白质修饰鉴定的首选技术,可以同时实现修饰类型、修饰位点以及修饰含量的鉴定。其基本原理是发生翻译后修饰的蛋白质在分子质量上会发生相应的增加,由于每种官能基团的分子质量是已知的,如果能检测到具体增加的分子质量,就可以确定修饰的类型,质谱技术能检测到这种分子质量的变化从而实现修饰方式的定性鉴定,再利用一级和二级质谱数据结合相关理论数据库以及生物信息学分析方法可以确定这种修饰的量以及修饰发生的氨基酸位点。