PCR是怎样完成扩增的呢?

PCR是怎样完成扩增的呢?PCR是聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction），实验过程是利用一段DNA为模板，在DNA聚合酶和核苷酸底物的共同参与下，将该段DNA扩增至足够的数量，以便进行结构和功能的分析。

若我们想要分析/探索基因的遗传信息，则需要大量的DNA片段，例如动物的组织；凶手的毛发、血液、皮肤；古生物；历史残骸；患者的组织等，可能只能分离出少量的DNA，若想研究其遗传信息，有着很大的阻碍和困难，在1985年，出现了一种方法：可以在短时间内大量复制DNA片段，此方法为PCR，它能将很微量的遗传物质在数小时内扩增数百倍达到检测水平，那么PCR是怎样完成扩增的呢? 让我们来一起学习一下吧！

1.高温变性

变性的目的是使模板DNA双链解旋成为单链以便与引物结合。此步骤将溶液加热至94-98C并保持20-30秒，破坏两条链之间的氢键并生成单链 DNA 分子;同时也激活了DNA 聚合酶，该步骤的时间取决于所使用的聚合酶。

2.低温退火

退火温度取决于所用引物的Tm，一般比引物Tm低3-5C左右。该步骤将持续约 20-40 秒，当反应温度隆低到50-65C时，引物与互补的DNA单链序列形成氢键，DNA聚合酶会结合至引物-模板双链处开始DNA合成。

3.中温延伸

延伸时间取决于目的DNA片段的长度和DNA聚合酶的合成能力。一般而言DNA聚合酶每60秒能够合成1kb长度的DNA。DNA模板-引物结合物在Taq DNA聚合酶的作用下，沿着5’一3’的方向合成一条与模板DNA链互补的链。延伸时的温度通常为72C。

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