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【生化3分钟】离子交换层析|零废话+全干货|生物化学考研助力

2023-08-05 22:12 作者:Forgotten_Sec  | 我要投稿

离子交换层析(离子交换色谱) [注:层析=色谱]

①目的:分离生物大分子(通常是蛋白质,其实氨基酸这种小分子也可以)

②原理:蛋白质或氨基酸等电点(pI)不同,即在不同pH下所带电荷不同。

③计算蛋白质带电情况的简便方法:pI-pH为正带正电,反之负电,且绝对值越大电荷量越大。通过将pI的"I"抽象成数字编号"1"可以记忆pI写在式子的前面。

④离子柱带的电荷:阴/阳离子柱命名是依据所吸附的电荷负/正,因此叫什么柱就可以吸什么离子,自己本身就是相反电性的离子。

⑤上样和洗脱方法:低盐上柱,高盐洗脱。(因为后续需要用同种电荷与被提纯物竞争,降低后者亲和性)[疏水层析是"高盐上柱,低盐洗脱",因为低盐使环境更不疏水,降低亲和性]

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