安诺伦代理品牌Pluriselect——结肠癌循环肿瘤细胞筛选方法
Pluriselect提出了一种新的结肠癌循环肿瘤细胞(CTC)筛选方法，使用携带肿瘤相关EpCAM抗体的多链抗体。
该方法基于非磁性细胞分离技术。它不需要任何样品预处理。EpCAM-pluriBead可以直接加入到全血样品中。该方法也适用于从不同的生物流体中分离单细胞。此外，还可以通过增加样品体积来提高其灵敏度。结合的EpCAM阳性结肠癌细胞可以容易地参与进一步的分子遗传学实验，该实验旨在检测它们的突变状态。在结肠癌的情况下，K-ras突变状态是响应抗癌治疗的预测工具。因此，该新方法可被认为是用于早期癌症诊断的快速有效的工具。
结果
图1a和1b:用抗EpCAM-PE染色的Caco-2细胞的流式细胞术分析。
图2a:EPC am-pluriBead捕获的结肠癌Caco-2细胞。
图2b:捕获的结肠癌Caco-2细胞，用钙黄绿素染色。
图2c:用50万EpCAM-pluriBead在30 ml全血中掺入捕获的结肠癌Caco-2细胞
图3:使用将BsTN1限制性酶位点引入PCR产物的引物，通过PCR筛选结肠癌细胞系中K-ras癌基因12h密码子突变的存在。
图4a:在已知数量的掺入Caco-2细胞中检测K-ras原丝原的PCR方法的灵敏度。图4b:通过EpCAM-pluriBead捕获的从Caco-2细胞分离的EpCAM和CK 20 mRNA的RT-PCR产物(作为阴性对照，使用来自全血的mRNA)。
结论和展望
Pluriselect开发了一种新的方法，使用EpCAM-pluriBead检测血液中的循环结肠肿瘤细胞。捕获的细胞适于与肿瘤形成相关的特定标记的进一步分子遗传筛选。所开发的“原位免疫珠pcr”方法不需要预先的RNA/DNA分离，并且可以有效地节省分析时间。这项工作的进一步目标是提高方法的灵敏度，增加样品体积，改变细胞肿瘤细胞系和/或抗体特异性。
