基础生物实验 3 - 实验一模拟(中翻):Experimental Design 实验设计

本期是实验一的模拟部分(中文),内容是实验设计:Ex-P药物是否是导致肾损伤的原因?
本部分内容来自 University of California, Berkeley - UC Berkeley Extension, 虚拟实验的内容来自 Labster. 本部分内容均不会标记为为原创,但由于是UP主购买的课程,因此不接受非授权的转载,谢谢您的理解。
每一个生物基础实验均会分为三部分:第一部分为实验的生物理论;第二部分为实验的指导手册;第三部分为 Labster 的虚拟实验模拟。第一部分的基本信息由 Ying Liu, Ph.D. 提供,第二部分的实验手册来自 Labster, 第三部分的实验模拟过程由UP主操作。
本期的模拟过程会包括虚拟实验室的图片以及UP主的中文。
文中的第一人称是AI机器人 Dr. One.
先是背景介绍:
Dr. One 说最近有不少肾病患者,机器人怀疑一种名为Ex-P的药物导致了这种肾损伤。不懂英文的可以跳过前面这几张图。









也就是说,这个机器人怀疑这个名为Ex-P的药物导致了这种肾损伤。Ex-P含有三种物质,其中的每一种都不能单独造成健康问题。
接着,穿上白大褂带上手套。

接下来是显微镜观察。









我们刚刚完成了“观察”,现在开始提出问题:







将物质A、B、C分别加入不同的试管后,分别再加入缓冲剂,获得物质A、B、C的血浆溶液。


现在将三种(ABC)血浆溶液一起用吸管/移液器加入到一个肾上皮细胞培养板中:




将其放入恒温箱:

等待恒温箱慢慢培养。总结一下:

恒温箱的温度、时间及其它固定条件就是控制变量。
培养好了,取出来观察观察:

荧光显微镜:可以回顾上期,看不懂英文的朋友就别去看了。荧光显微镜简单来说可以看到荧光染色。在本次实验中,荧光染色可以进入已经死亡的细胞,因为死亡的细胞的细胞膜已经不具备保护隔离的功能。我们刚刚培养的细胞还没有染色,因此在荧光显微镜下应当看不出细胞的区别。

因此我们现在来给细胞染色再观察。


等待15分钟,让多聚甲醛充分反应。之后用PBS缓冲液来清洗培养的细胞以获得更好的成像。




之后,吸出荧光染料并倒入液体废物瓶中,再次用PBS缓冲剂清洗培养细胞。
现在再放在荧光显微镜下观察:


实验对照:


实验样品:肾上皮细胞 + 加入物质A、B、C(来自Ex-P)的血浆溶液,与之前的培养一致。
阴性对照:肾上皮细胞 + 缓冲剂:不造成刻意的肾损伤。
阳性对照:肾上皮细胞 + 红色物质X,确定造成肾损伤。

从恒温箱中取出后,再对它们进行染色。
我们的期待应该是:
阴性对照:没有大量细胞被染色;
阳性对照:有细胞死亡且被染色。
如果在阴性对照中发现大量染色细胞,则意味着实验是有缺陷的。
阴性对照结果:

阳性对照结果:

实验样品结果:

实验做完了,现在你被叫去开会:

他们问了你几个问题:
1. 你的结果是什么?
2. 你的结果可靠吗?

“看起来” - 看来这一结果还不够确凿。怎么样才能证明Ex-P的问题呢?

最后一个问题:当你重复实验之后,你需要怎么做?

好啦!本次实验模拟就到此结束啦!希望大家喜欢!也请大家多多给我反馈喔!