EZElisa人碱性成纤维细胞生长因子ELISA试剂盒数据分析
FGF碱性,也称为FGF2(成纤维细胞生长因子2)或HBGF 2(肝素结合生长因子2。家族成员共享35-60%的氨基酸(aa)同一性,但只有FGF酸性和碱性缺乏信号肽,并且由替代途径分泌。18kDa的FGF。EZElisa™ 人bFGF-ELISA试剂盒采用双抗体夹心法对样品中的人bFGF进行定量。一种针对人bFGF的特异性抗体已经被预包被在微孔板上。将标准品和样品移液到孔中,并且存在的任何人bFGF被固定化的抗体结合。去除任何未结合的物质后将对人bFGF特异性的生物素缀合的抗体添加到孔中。洗涤后,将专有的Streptavidin-HRP缀合物加入孔中。洗涤去除任何未结合的链亲和素酶试剂后,加入HRP底物(TMB),TMB在HRP的催化下变蓝,加入终止溶液后变黄。用微孔板读数器在450nm波长下测量OD值。bFGF浓度与OD450nm值成比例。 艾美捷EZElisa人碱性成纤维细胞生长因子ELISA试剂盒基本参数: 目录号:D-AEK6006 规格:48T/96T 储存:在4°C下储存12个月,避光 检测范围:15.63 pg/mL-1000 pg/mL 灵敏度:8 pg/mL 特异性:EZElisa™ 人bFGF-ELISA试剂盒对人bFGF的检测具有高灵敏度和良好的特异性。在人bFGF和类似物之间没有观察到显著的交叉反应性或干扰 适用样品:血清、血浆、细胞培养上清液
试剂准备: 1×样品稀释剂:样品稀释剂(5×)平衡至室温,用去离子水1:5稀释,得到使用前的1×样品稀释剂。轻轻搅拌以避免起泡。在4°C下储存。该溶液可稳定使用30天。如果您样品需要稀释,1×样品稀释液用于稀释标准品、血清和血浆样品。 1×测定缓冲液:测定缓冲液(5×)平衡至室温,用去离子水1:5稀释,得到1×使用前的测定缓冲液。轻轻搅拌以避免起泡。在4°C下储存。该溶液可稳定使用30天。1×测定缓冲液用于稀释人bFGF检测抗体(100。人bFGF标准品:在1 mL 1×样品稀释液中重新配制人bFGF标准品,浓度为1000 pg/mL。稀释前,让标准品静置至少15分钟,轻轻摇晃 1×人bFGF检测抗体:在稀释前充分混合。对人bFGF进行1:100稀释检测抗体(100×),根据标准和样品的需要,在干净的塑料管中加入1×测定缓冲液。1×人bFGF检测抗体应在30分钟内使用。1×链霉亲和素HRP:在稀释前充分混合。用1倍含量测定法对链霉亲和素HRP(100倍)进行1:100稀释根据标准和样品的要求,在干净的塑料管中缓冲。应使用1×链霉亲和素HRP在30分钟内。 HRP底物(TMB):按供应准备使用。使用前将其平衡至室温。储存在4°C,有保护来自光线 停止解决方案:随附随用。使用前将其平衡至室温。在4°C下储存。 1×洗涤缓冲液:洗涤缓冲液(20×)平衡至室温,用去离子水1:20稀释,得到1×使用前清洗缓冲液。轻轻搅拌以避免起泡。在室温下储存。请注意,1×洗涤缓冲液稳定30天。 标准曲线设置:用1×样品稀释剂稀释1000 pg/mL标准品至1000、500、250、125、62.5、31.25、15.63和0pg/mL人bFGF标准品。 数据分析: 1.1.平均每个标准品和样品的重复读数,并减去平均零标准(Std.8)光学密度(O.D.)。 2.绘制标准曲线:承受x轴标准溶液浓度和各轴平均吸光度标准作为轴,绘制标准曲线。可以使用计算机软件来创建标准曲线。 注:如果样品已稀释,则从标准曲线读取的浓度必须乘以稀释度因素 典型数据:
图1.人bFGF在96孔板测定中的标准曲线,提供的数据仅用于证明目的。新的
必须为每个分析生成标准曲线
该试剂仅用于科学研究领域,不适用于临床诊断或其他用途。