DNA测序的两种方法
2022-10-28 12:01 作者:biofount科研试剂 | 我要投稿
DNA测序使用荧光标记的核苷酸,这些核苷酸在PCR过程中掺入。基于荧光检测技术,有两种主要的测序方法:Sanger测序和二代测序。
Sanger测序
Sanger测序由Fredric Sanger于1975年开发,是第一种开发的测序方法。它也被称为链终止方法,因为它参与体外DNA合成过程中链终止ddNTP的选择性掺入。在Sanger测序中,扩增子通过凝胶电泳分离。Sanger测序广泛用于测定克隆中使用的DNA片段序列和通过PCR扩增的片段。确定的DNA序列如图所示。
二代测序
最新的DNA测序技术统称为二代测序。它也是一种链式终止方法。二代测序使用毛细管电泳分离通过链终止方法产生的具有不同长度的扩增子。二代测序用于每次运行测定大量核苷酸,例如基因组测序。