IIS型限制内切酶，Golden Gate克隆的好帮手！
1970年，Ⅱ型限制性核酸内切酶Hind II由Smith等首先在流感嗜血杆菌的Rd型菌株中发现。Smith也凭借在限制酶领域开创性的研究，与Daniel Nathans、Werner Arber一起获得1978诺贝尔生理学或医学奖。
II型限制性核酸内切酶
Ⅱ型限制性核酸内切酶是一类分子质量较小的单体蛋白，识别和切割双链DNA分子时仅需要Mg2+存在即可，不需要ATP。其切割序列常常是4-6 bp回文结构，有两种切割方式，一种是交错切割，形成粘性末端，另一种是在同一位置上切割双链，产生平末端。
Ⅱ型限制性内切酶也可以分成很多小类别，识别的序列也各有特点；
doi.org/10.1093/nar/29.18.3705
其中IIS型限制性内切酶的序列识别区域和催化区域被一个多肽连接子分开，一般以单体形式结合，但会以瞬时同源二聚体形式发挥切割作用。
doi.org/10.1093/nar/gku447
IIS型限制性内切酶
IIS型限制性内切酶切割DNA产生的粘性末端通常为2个碱基或4个碱基。在连接反应中，粘性末端的碱基数越多，连接产物的保真度越高，因此Golden Gate Assembly通常采用能够产生4碱基粘性末端的IIS限制酶，常用的有BsaI、BsmBI和BbsI 。
三种IIS型限制性内切酶的特异性可分别记为：BsaI (GGTCTC 1/5),BsmBI (CGTCTC 1/5),BbsI (GAAGAC 2/6)。除此之外，能够产生3碱基粘性末端的IIS型限制酶SapI (GCTCTTC 1/4) 也常被使用。
ABclonal可以提供RK21129|Eco31I (BsaI)，规格1000U ，Eco31I，是BsaI的同裂酶，与BsaI的功能相同。可以特异性识别双链DNA位点(图1）并进行酶切，适用于质粒DNA、PCR 产物或基因组 DNA 等的限制性酶切。结合连接试剂在配套的Buffer中具有100%活性，支持一管化反应，提升“酶切-修饰-连接”的体验。其识别序列和切割位点如下图：
应用场景
1.分子克隆（Golden gate cloning）；
2.基因编辑;
3.合成生物学;
产品特点
01酶切效果
媲美进口品牌N*
02高性能搭配高浓度T4 连接酶，适用于SgDNA，单片段及多片段连接，且连接效率与竞品相当
支持高浓度和低浓度及定制浓度，满足客户多种需求
产品数据展示
1、酶活鉴定
以1μg质粒为模板，20ul反应体系，投入10U Eco31I，37℃ 反应1h，80℃ 失活20min；活力与竞品的活力相当。
2、Sg DNA连接效率鉴定
ABclonal Eco31I(BsaI）在Sg1和Sg2的连接效率均为90%-100%，与竞品N，竞品T竞品相当，高于竞品M活性。
3、单片段连接效率(250bp,1kb）
ABclonal Eco31I(BsaI）在250bp连接效率为100% ，与竞品N相当；1kb连接效率为40%，高于竞品N（ 20%）。
