氧化酶测试（ 原理、组成、结果解释）
氧化酶测试是用于确定细胞色素 c 氧化酶存在的程序。 该系统的作用是帮助氧化还原染料四甲基对苯二胺和细菌的电子供体之间的电子移动。
它有助于识别能够产生细胞色素 c 氧化酶的细菌； 存在于细菌电子传递链中的一种酶。 它被称为氧化酶测试，因为如果酶存在，酶不会导致试剂氧化，从而产生紫色的最终产物（吲哚酚）。
如果没有发现酶，就没有氧化。 因此，试剂的颜色保持不变。
图片 1：图片显示了用于氧化酶测试的需氧菌。
注意：氧化酶测试呈阳性的细菌是好氧的。 他们可以在呼吸中利用氧气。 另一方面，氧化酶测试呈阴性的细菌可以是需氧的、厌氧的或兼性的。这意味着这些生物体没有试剂氧化所需的酶细胞色素 c 氧化酶。
需要准备
带基材的湿滤纸
纸盘（市售）
由木头或铂金制成的线材
试剂如：
科瓦奇氧化酶试剂
戈登和麦克劳德试剂
Gaby and Hadley（靛酚氧化酶）试剂
氧化酶检测的目的
它有助于确定生物体是否具有细胞色素氧化酶。
它有助于区分某些细菌菌株，如莫拉菌属、奈瑟菌属、巴氏杆菌属和弯曲杆菌属。
它有助于区分假单胞菌和其他相关物种。
图 2：湿滤法氧化酶测试。
图 3：干滤法氧化酶测试。
图 4：直接平板法氧化酶测试。
图 5：拭子法氧化酶测试。
图 6：试管法氧化酶试验。
步骤
可以使用各种方法进行氧化酶测试。我们将在下面讨论常用的方法。
1.干滤纸——这是最方便的方法。程序如下：
将滤纸（Whatman's #1）浸泡在 1% 的四甲基对苯二胺二盐酸盐溶液中。
沥干约半分钟。
将滤纸冷冻干燥，装入瓶中；最好是深色的，并带有用螺钉固定的盖子。
如果使用，必须取出试纸条，用蒸馏水润湿试纸条并放入培养皿中。
使用环（铂），挑选菌落并涂抹在潮湿的部分。
2.湿滤纸——之所以称为湿滤纸法，是因为滤纸浸泡在 1% 的试剂溶液中。使用环（由铂材料制成）在滤纸上摩擦培养物。
3.直接板 - 添加试剂；理想情况下，将两到三滴滴到琼脂板上的可疑菌落上。只需添加足够的试剂，因为添加过多的试剂会改变结果。注意 10 秒内颜色的任何变化。这种类型的氧化酶测试应该在琼脂板上进行（非选择性）。
4.拭子法——拭子应浸入试剂中，并应与疑似分离菌落接触。注意 10 秒内颜色的任何变化。
5.试管——新鲜的细菌培养物在营养肉汤（4.5 ml）中生长。生长应在 18 至 24 小时内完成。加入 Gaby 和 Hadley 试剂（0.2ml）。摇动试管以确保混合物充分混合并且培养物充分充氧。注意颜色的任何变化。
结果解释
阳性 - 如果您在 10 秒内注意到强烈的深紫色色调，则结果为阳性。
延迟阳性 – 如果深紫色在 60 秒内出现。
阴性 – 如果颜色完全没有变化或在 60 秒后发生变化，则结果为阴性。
