CFDA-SE,细胞增殖示踪荧光探针
CFDA-SE简介
CFDA-SE,细胞增殖示踪荧光探针，是细胞膜可渗透的，并且很容易在活细胞内积聚，在那里它与细胞内蛋白质共价结合。 水解的 CFSE 发出绿色荧光，共价连接的荧光素分子不会从细胞中泄漏。 CFSE 标记的细胞可以在体内监测数周。 因此，CFSE 可用于检测活细胞以及通过荧光显微镜对细胞活动进行长期观察。 CFSE 标记细胞的激发和发射波长分别为 500 nm 和 520 nm。
细胞增殖示踪荧光探针(CFDA SE) 使用方法：
1.CFSE储存液（5mM）的配制
用1ml DMSO溶解2.79mg CFSE，充分混匀即得到5mM的储存液（1mg/ml的CFSE溶液浓度相当于其摩尔浓度1.8mM）。
【注意】该储存液需立即使用，根据使用量计算如有剩余请务必分装后于≤-20℃避光干燥保存，避免反复冻融。
2.CFSE工作液（0.5-5µM）的配制
使用前用含20mM Hepes的Hanks 缓冲液（HHBS）或其他不含氨基的合适缓冲液（pH=7.0）对上述CFSE 储存液进行1,000~10,000倍稀释，并旋涡震荡混匀。
3.操作方法
活细胞染色的推荐步骤，可根据实际情况进行适当调整。
根据实验要求，用适当药物处理细胞；
离心收集细胞，调整细胞浓度为1-5×105个/管；
用500µl CFSE工作液悬浮细胞，于室温或37℃避光孵育10-30min；
吸除CFSE 染液，用HHBS或其他合适缓冲液清洗细胞，用500µl预热HHBS或培养液悬浮细胞；
在Ex/Em=490/520nm下用流式细胞仪（FL1通道）或荧光显微镜观察细胞。
CFSE 细胞染色
细胞类型：海拉HeLa
细胞增殖示踪荧光探针(CFDA SE) 应用领域：
1.细胞增殖检测（尤其对淋巴细胞）
2.体内示踪
3.细胞荧光标记
4.细胞毒性检测
