Fura red AM；钙离子荧光探针
Fura Red 是一种可见光可激发的 fura-2 类似物，当与单激发、绿色荧光钙指示剂一起使用时，它提供了通过显微光度法、成像或流式细胞术对单细胞中钙离子进行比例测量的独特可能性。 Fura Red AM 是 Fura Red 的细胞渗透版本，用于无创细胞内加载。 Fura Red AM 可以与 Fluo-3 AM、Fluo-8 AM 或 Cal-520 AM 同时加载到细胞中。 结合两种钙染料的一个优点是可以使用具有更长激发波长的染料。 这通常比使用用紫外线或近紫外线激发的比例染料（例如 Fura-2）对细胞造成的伤害更小，因为可见波长的光的光毒性较小。
图1.Fura red AM化学结构
以下是我们推荐的将 AM 酯加载到活细胞中的protocol。 本protocol仅提供指导原则，应根据您的具体需要进行修改。
在生长培养基中过夜制备细胞。
第二天，将 1X Fura Red AM 工作溶液添加到您的细胞板中。
注意：如果您的化合物干扰血清，请在染料加载前用新鲜的 HHBS 缓冲液替换生长培养基。
在 37 °C 的细胞培养箱中孵育载有染料的板 30 至 60 分钟。
注意：孵育染料超过 1 小时可以提高某些细胞系的信号强度。
用 HHBS 或您选择的缓冲液（包含阴离子转运抑制剂，如 1 mM 丙磺舒，如果适用）替换染料工作溶液，以去除任何多余的探针。
根据需要添加兴奋剂，同时使用荧光板读取器监测荧光强度，其中包含可编程液体处理系统，例如 FlexStation，在 Ex/Em1 = 435/630 nm 截止 610 nm 和 Ex/Em2 = 470/650 nm 截止 630 纳米。
Fura red AM光谱特性
激发（纳米）：435
发射（纳米）：639
图2.Fura red AM光谱图
