脑缺血(CI)大鼠模型
脑缺血是一种常见病,已成为引起人类死亡的第三大原因。大脑中动脉(MCA)是人群脑卒中的多发部位,MCA闭塞(Middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型被普遍认为局灶性脑缺血的标准动物模型,主要有开颅法、光学法、线栓法、栓塞法。下面我们看看常见的栓线法......
制备
动物品系:SD大鼠,SPF级,健康,雄性,体重:250g-300g
造模方式:缺血再灌注(MCAO线栓法)
实验分组:对照组,模型组,阳性药物组,受试药物低、中、高组
造模方法
1.麻药腹腔注射麻醉大鼠,使其仰卧固定于手上台上,颈部备皮,消毒,插入肛温探头,保持体温在37±0.5℃。
2.颈部正中切口,暴露右侧颈总动脉和迷走神经,再逐步暴露劲总动脉分叉,颈内动脉和颈外动脉。使用6-0丝线在距离颈总动脉分叉4mm处结扎颈外动脉远心端,在颈外动脉穿入另一根6-0丝线,在靠近颈总动脉分叉处打一个活结。
3.使用动脉夹夹闭颈总动脉。在距离颈总动脉分叉处3mm处的颈外动脉上剪一个小口,将一根头端处理过的0.33mm直径的尼龙线从小口中插入,进入颈内动脉,并向内插入大脑中动脉,尼龙线的插入深度距离颈总动脉分叉处约16±1mm。
4.缺血后90min拔掉线栓,用6-0丝线结扎外动脉近心端,用3-0丝线缝合颈部伤口,活力碘消毒伤口,将大鼠放在加热垫上,待清醒后放入恒温抚养箱饲养。
5.术后24h,对大鼠进行神经功能评分。
6.用TTC染色来确定脑梗死容积,做病理染色。
神经功能评分
参考longa及Bederson的5分制法在动物麻醉清醒后24h进行评分,分值越高,说明动物行为障碍越严重。
0分:无神经损伤症状
1分:不能完全伸展对侧前爪
2分:向对侧转圈
3分:向对侧倾倒
4分:不能自发行走,意识丧失
TTC染色:正常脑组织染色后呈鲜红色,而梗死区呈苍白色