前列腺素 E2快速检测ELISA试剂盒检测原理丨开曼生物
背景：
前列腺素E2是多种细胞内花生四烯酸的主要代谢产物，象类花生酸一样，不能在胞内储存.当细胞被激活或者提供自由花生四烯酸后，PEG2才能被合成，并释放到胞外；在体内，通过15-脱氢酶途径，PEG2能快速转变成为无活性的13,14-dihydro-15-keto PGE2.PEG2的半衰期为30秒，在正常血液中的含量为3-12pg/ml.
艾美捷 开曼生物 前列腺素E2快速检测ELISA试剂盒检测原理：
本试验基于PGE2和PGE2-乙酰胆碱酯酶（AChE）结合物（PGE2示踪剂）之间的竞争，以获得限量的PGE2单克隆抗体。由于PGE2示踪剂的浓度在PGE2浓度变化时保持恒定，因此能够结合到PGE2单克隆抗体的PGE2示踪剂的量将与孔中的PGE2浓度成反比。该抗体-PGE2复合物与先前连接到微孔的山羊多克隆抗小鼠IgG结合。清洗培养板以去除任何未结合的试剂，然后将Ellman试剂（含有乙酰胆碱酯酶基质）添加到孔中。该酶反应产物具有明显的黄色，并在412 nm处强烈吸收。通过分光光度法测定的该颜色的强度与结合到孔中的PGE2示踪剂的量成正比，该示踪剂的量与孵化期间孔中存在的游离PGE2的量成反比；该过程的示意图如下图所示。
图：乙酰胆碱酯酶的示意图
艾美捷 开曼生物 前列腺素E2快速检测ELISA试剂盒特点：
已经证明能在尿液，血液或者培养基样本中使用.一般情况下，尿液或者培养基样本需稀释后，直接用于试剂盒检测；对于血液样本，需要预先纯化，因为PEG2在血液样本中会很快代谢掉.
艾美捷 开曼生物 前列腺素E2快速检测ELISA试剂盒检测标准：
用1.0 ml ELISA缓冲液重新配制PGE2 Express ELISA标准品内容物。该溶液（散装标准品）的浓度将为10纳克/毫升。储存在4°C下；该标准将稳定长达四周。
注：如果测定未用ELISA缓冲液稀释至少10倍的培养基样品，应使用培养基代替ELISA缓冲液稀释标准曲线和样品。
制备用于ELISA的标准品：获得八个干净的试管，并将其编号为#1到#8。等分800µl ELISA缓冲液至试管#1和500µl ELISA缓冲液至试管#2-8。将200微升散装标准品（10纳克/毫升）转移到试管#1中，并彻底混合。标准曲线上的个点，该标准品的浓度为2纳克/毫升（2000微克/毫升）。通过从管#1中去除500µl并放置在管#2中连续稀释标准溶液；彻底混合。接下来，从管#2中取出500µl，放入管#3中；彻底混合。对管道4-8重复此过程。这些稀释标准品的储存时间不应超过24小时。
