溴化乙锭(Ethidium bromide,EB)

基本信息

溴化乙锭（EtBr）或3，8-二氨基-5-乙基-6-苯基菲啶通常用作DNA染色的非放射性标记，以便在电泳和其他基于凝胶的核酸分离方法中识别和可视化核酸条带。EtBr是一种深红色，结晶，非挥发性，无味的粉末，适度溶于水。这种材料在紫外（UV）光下发出红橙色荧光，当与双链DNA结合时荧光增加。虽然它是基因组研究的有效工具，但其危险特性需要特殊的安全处理和处置。

健康与安全

EtBr是一种强效诱变剂（可引起遗传损伤），急性暴露后具有中度毒性。EtBr可以通过皮肤吸收，因此避免与化学物质直接接触非常重要。粉末形式被认为是对上呼吸道，眼睛和皮肤的刺激物。尽管目前没有证据表明人类致癌或致畸性，但应将这种物质视为可能的致癌物或致畸剂。已经发现一些替代染色剂比EtBr具有更低的致突变性和毒性。如果缺乏毒理学数据或不清楚，则应以与EtBr相同的方式处理染色剂。一些替代污渍悬浮在二甲基亚砜（DMSO）中，其本身对健康有影响，包括增加皮肤对有机化合物的吸收。

良好实验室规范

保持整体良好的实验室工作规范有助于降低危险暴露的风险。

处理粉末、晶体或溶液时，请在通风橱中工作，以防止吸入暴露。

使用EtBr时，请穿实验室外套，长裤，露趾鞋，护目镜（安全眼镜或护目镜）以及丁腈或氯丁橡胶手套。工作完成后，将实验室外套，手套和其他PPE留在实验室中，以防止这种或其他化学物质在实验室外传播。

为研究人员/用户提供有关EtBr的危害，使用和适当清理程序的安全培训。审查工作的相关标准操作程序（SOP），安全数据表（SDS）。

在二级密封中运输，并使用少量的EtBr，以最大限度地降低事故风险。

处理DNA染色剂时，需要仔细的内务管理。描绘并限制可以使用DNA染色的区域。在昏暗的房间中用紫外线检查其他区域，并按照以下污染表面的去污程序进行操作。

当紫外线光源与EtBr程序一起使用时，需要更加小心。作为一般规则，避免将未受保护的皮肤和眼睛暴露在强烈的紫外线源下。如果紫外线朝上，当您站在光源附近时，请戴上紫外线防护面罩。对于靠近紫外线灯箱或其他强烈光源的长期工作，用遮蔽胶带松散地包裹实验室外套袖子的末端以防止手腕暴露的间隙可能是有用的。

溴化乙锭应远离强氧化剂储存在阴凉干燥处，容器必须保持完好无损并密闭。

实验案例

A-负超螺旋质粒结合有限量的溴化乙锭（橙色），但在消化时，乙锭继续与线性DNA分子结合直至饱和。

B-这些插图中的每一个都对应于面板A中的上述条件。限制性内切酶（蓝色）通过与DNA的骨架和碱基进行特定接触来找到其识别位点。插入识别位点的乙锭越多，DNA的形状就越扭曲，从而阻止酶识别限制性位点。