草莓组培室设计方案-上海农卉组培

　　草莓作为应时鲜果以其突出的经济价值和生态功能在我国得到大面积的推广种 植。由于种植草莓多采用无性繁殖，容易感染多种病毒。主要是草莓斑驳病毒、草莓轻性黄 边病毒，草莓皱缩病毒和草莓镶脉病毒，草莓病毒病给草莓生产造成严重的危害，使草莓减 产，严重影响生产。 由于生产生活需要和现有的栽培条件限制，产量高、品质好及抗性强的草莓 脱毒苗的生产和育种困难。

　　5--6月于晴天的下午在健壮、无病的草莓刚抽出的匍匐茎上取茎尖，大小为0．3--0．4mm，作为组织培养的外植体。

　　用于草莓茎尖培养诱导芽分化的基本培养基为MS，附加6--BA0．5mg/L，NAA0．2mg/L，蔗糖30g/L，琼脂粉6．5g／L，pH值调至5．8--6．0。

　　在草莓茎尖的扩大繁殖阶段，采用MS培养基附加6-BA0．5mg/L、NAA0．01mg/L。扩大繁殖主要是将丛生苗分块即每5--7株切成一块，转入继代培养基。在转苗过程中，去掉原生叶片有利于新苗分化，在扩大繁殖中随时清除愈伤组织，有利于新苗增殖和生长。

　　诱导生根培养基用1／2MS附加不同浓度IBA。试验表明：以IBA0．1mg/L的浓度处理的生根率高，为100％，平均根条数为2．4条。不加IBA及IBA浓度超过0．2mg/L，多数苗都是先于苗基切口处产生愈伤组织，随后在愈伤组织上分化生根，致使成活率大大降低。

　　预处理 为了灭菌彻底，常把接种材料先进行湿润处理，使灭菌剂能顺利地渗入材料。可用多种湿润剂，我们采用的是75％的酒精，湿润的时间为半分钟至1分钟。

　　灭菌处理 在草莓组织培养中常用灭菌剂的种类很多。我们曾用过次氯酸钠10％水溶液(含有效氯0．4--0．5％)，浸泡接种材料10--15分钟；次氯酸钙(漂白粉)，用其饱和上清液，浸泡接种材料15--30分钟；过氧化氢10--12％水溶液浸泡10--20分钟；新洁尔灭5--10％水溶液，浸泡10--15分钟；升汞0．1％水溶液，浸泡8--10分钟。其中前4种灭菌剂对接种材料比较安全，但因灭菌时间较长，常常使接种材料的外层氧化变褐，以致影响培养效果。升汞有很强的杀菌能力，但浸泡时间稍长会造成接种材料中毒。因此，在草莓组织培养中，如把握好时间，升汞是应用较多的灭菌剂。灭菌后的接种材料，要用无菌水充分清洗，通常要换水3--5次。

　　接种 以培养无病毒苗为主要目的的草莓组织培养，所接种的茎尖材料很小，在接种时首先要求准确熟练地剥取茎尖生长点，并使用固体培养基比较适宜，接种时应注意不能将整个茎尖埋入培养基中。培养基须用1--1．1大气压热压灭菌20分钟。

　　一种草莓组织培养方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、选择外植体：于5~6月份晴天的下午，取健壮、无病草莓植株刚抽出的匍匐茎茎尖，大小为0.3~0.4mm，作为组织培养的外植体茎尖；步骤二、准备培养基：1）分化培养基：用于草莓茎尖培养诱导芽分化阶段的基本培养基为MS培养基，附加6?BA 0.5mg/L，NAA 0.2mg/L，蔗糖30g/L，琼脂粉6.5g/L，并调节培养基pH值为5.8~6.0；2）继代培固体养基：用于草莓茎尖的扩大繁殖阶段的基本培养基采用MS培养基附加6?BA 0.5mg/L、NAA 0.01mg/L，调节培养基pH值为5.8~6.0；3）诱导生根培固体养基：待幼苗长至2cm以上，即可切下单株转移至生根培养基为1/2MS培养基附加0.2mg/L的NAA，调节培养基pH值为5.8~6.0；步骤三、灭菌：将步骤一中得到的组织培养的外植体茎尖用0.1%升汞水溶液浸泡茎尖8~10分钟，并每隔2分钟摇晃一次，完成灭菌；步骤四、接种：在培养室中，将步骤二中的培养基放置于培养瓶中，将步骤三得到的灭菌后的茎尖，转移至步骤二中得到的分化培养基中；待愈伤组织长出小植株时，切取绿色部分...