对牛做OPU活体取卵工作，需要使用超声活体采卵仪做引导，通过超声图像来观察母牛卵泡位置和发育程度，引导采卵针进行采卵。

对牛活体采卵步骤如下：

• 使用超声活体采卵仪观察母牛卵泡，该扫描仪配备 6.5 MHz 扇形探头（动态成像模型 MCV），安装在定制的阴道内 OPU 探头支架中。

• 将 18 号一次性皮下注射针头通过聚四氟乙烯管连接到 50 ml 锥形管用于毛囊穿刺。

• 使用真空抽吸泵施加负压，抽吸真空调节至每分钟 15 毫升水的流速（具体数值可以根据不同品牌的负压泵进行调节）。

• 将收集管置于39℃恒温槽中（有些真空泵自带恒温槽）。

• 奶牛接受硬膜外麻醉防止它们在手术过程中紧张。

• 清空直肠并清洁外阴和会阴区域后，将采卵仪探头插入yd。

• 卵巢经直肠操作并放置在探头前面，以便在采卵仪屏幕上获得清晰的图像。

  
  

• 在 OPU 之前、期间和之后，针头和聚四氟乙烯管都需经过彻底冲洗，以防止血液凝结或卵母细胞粘附在聚四氟乙烯管上。

• 在 OPU 之后，立即使用立体显微镜搜索卵母细胞，清洗并转移到成熟培养基中。