单克隆抗体和动物体细胞核移植技术来喽~ 【选必三】|0基础救星！
喵喵 | 2-5 动物细胞融合和体细胞核移植技术
1️⃣动物细胞融合技术
- 动物细胞融合
（1）细胞融合定义：两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，
也称细胞杂交。
（2）原理:细胞膜的流动性。
（3）诱导方法：PEG融合法（聚乙二醇）、电融合法和灭活病毒诱导法等。
（4）意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。
（5）应用：单克隆抗体
【植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较】
植物体细胞杂交
- 原理：细胞膜的流动性、植物细胞的全能性
- 细胞融合方法：酶解法：去细胞壁后诱导原生质体融合（使用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁）
- 诱导手段：
- 物理法：电融合法、离心法等
- 化学法：如，聚乙二醇融合法、高Ca²⁺-高pH融合法等
- 结果：获得杂种植株
- 用途：克服远缘杂交不亲和的障碍
动物细胞融合
- 原理：细胞膜的流动性、细胞增殖
- 细胞融合方法：用胰蛋白酶处理，使细胞分散后获得单个细胞，诱导细胞融合（作用于细胞间的蛋白质）
- 诱导方法
- 物理法：电融合法
- 化学法：聚乙二醇融合法
- 生物法：灭活病毒诱导法
- 结果：获得杂交细胞
- 用途：制备单克隆抗体
例题1
关于动物细胞融合的说法不正确的是
A. 动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程
B. 动物细胞融合后形成的具有原来两个或多个动物细胞遗传信息的单核细胞称为杂交细胞
C. 常用于诱导动物细胞融合的手段有：聚乙二醇、灭活的病毒、电激、紫外线照射
D. 细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能
2️⃣单克隆抗体
（1）含义：
抗体是由B淋巴细胞转化而来的浆细胞分泌的，每个B淋巴细胞株只能产生一种专有的、针对一种特异性抗原决定簇的抗体。这种从一株单一细胞系产生的抗体就叫做单克隆抗体（McAb)，简称单抗。
（2）原理：一种B淋巴细胞在抗原的刺激下，只能产生一种针对这种抗原的特异性抗体。
骨髓瘤细胞能够无限增殖，B淋巴细胞与其融合后形成的杂交瘤细胞既能迅速大量增殖，又能产生单一抗体。
【提问】
- 第一次筛选?
选择培养基筛选杂交瘤细胞
2. 第二次筛选?
经过克隆化培养和抗体检测筛选产生特定抗体的杂交瘤细胞
（1）技术手段：动物细胞培养、动物细胞融合等。
（2）单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高、可大量制备。
（3）单克隆抗体的应用
①作为诊断试剂
②用于治疗疾病和运载药物：如用单克隆抗体运载抗癌药物，制成“生物导弹”靶向治疗肿瘤。
例题2
若用a表示骨髓瘤细胞，b表示B淋巴细胞，则单克隆抗体制备过程中的两次筛选可表示为
A. A
B. B
C. C
D. D✓
3️⃣动物体细胞核移植技术
- 定义
动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。
用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。
2. 原理
动物细胞核的全能性。
3. 种类
哺乳动物核移植可分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。
4. 过程
MII期：减二中期
【提问】
- 小克隆牛像谁？
- ①克隆动物的细胞质中遗传物质来自于卵母细胞并非供体细胞。
- ②生物性状的表达还受环境因素的影响。
2. 核移植技术与试管婴儿一样么？
不一样，核移植技术是无性繁殖。试管婴儿是有性繁殖
3. 该过程用到的技术手段？
动物细胞培养、核移植、早期胚胎培养和胚胎移植等
4. 过程
（2）生物（特别是高等动物）的克隆需要的基本条件：
①具有包含物种完整基因组的细胞核的活细胞（如乳腺上皮细胞）。
②能有效调控细胞核发育的细胞质物质（如去核卵的细胞质）。
③完成胚胎发育的必要的环境条件（如诱导核-质重组细胞生长、分化的实验条件和怀胎母体的子宫环境）。
（3）选卵细胞作为受体细胞的原因：
①体积大，易于操作。
②卵黄多，营养丰富，为发育提供充足的营养。
③MII中期的卵母细胞中含有促进细胞核全能性表达的物质。
5. 应用前景及存在的问题
（1）应用：
①加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育。
②保护濒危物种。
③医药卫生方面：
转基因克隆动物作为生物反应器生产医用蛋白；转基因克隆动物细胞、组织作为异种移植的供体，用于人类疾病的治疗；人的核移植胚胎干细胞经诱导分化，形成相应组织、器官，可用于组织器官的移植。
（2）问题
成功率低，产下的活克隆动物占移植克隆胚胎的比率平均不到10%；
绝大多数克隆动物存在健康问题，许多表现出遗传和生理缺陷，如体型过大、异常肥胖、发育困难、脏器缺陷、免疫失调等；
对克隆动物食品的安全性问题存在争议。
例题3
将绵羊的体细胞核移植到其去核的卵母细胞内形成重构卵（甲），可以培养成胚胎，并最终发育成完整个体。而将体细胞直接培养或体细胞核移植到未去核的卵母细胞内（乙）都不能形成胚胎。对这些现象的有关表述不正确的是
A. 绵羊的体细胞核具有发育的全能性
B. 特定的细胞质是实现细胞全能性的必要条件
C. 染色体数量的变异可能使乙不能实现细胞全能性的表达
D. 该技术的原理是动物细胞具有全能性【动物细胞核】
