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Abbexa丨Abbexa低样本量人血小板生成素ELISA试剂盒

2022-09-06 15:50 作者:艾美捷  | 我要投稿

艾美捷Abbexa人血小板生成素 (THPO) ELISA 试剂盒是一种 ELISA 试剂盒,用于体外定量测量血清、血浆和其他生物体液中的人血小板生成素 (THPO) 浓度。该方法对血小板生成素 (TPO) 的检测具有高灵敏度和出色的特异性,

未观察到血小板生成素 (TPO) 和类似物之间存在显着的交叉反应或干扰。

该试剂盒专为检测小体积样品而设计。

 

 

艾美捷Abbexa低样本量人血小板生成素ELISA试剂盒测定原理

该试剂盒基于夹心酶联免疫吸附测定技术。将抗体预涂在 96 孔板上。将标准品、测试样品和生物素结合试剂添加到孔中并孵育。然后加入 HRP 偶联试剂,并孵育整个板。在每个阶段使用洗涤缓冲液去除未结合的结合物。TMB 底物用于量化 HRP 酶促反应。加入 TMB 底物后,只有含有足够 THPO 的孔才会产生蓝色产物,然后在加入酸性终止溶液后变为黄色。黄色的强度与板上结合的 THPO 量成正比。光密度 (OD) 在酶标仪中以 450 nm 分光光度计测量,从中可以计算出 THPO 的浓度。

 

艾美捷Abbexa 低样本量人血小板生成素ELISA试剂盒套件:

预涂层 96 孔微孔板

标准

标准稀释缓冲液

洗涤缓冲液

检测试剂A

检测试剂B

稀释剂 A

稀释剂 B

TMB基板

封板机

 

艾美捷Abbexa该试剂检测程序

此过程仅供参考。应按照随附的说明书使用。

1) 设置标准、测试样品和对照孔。

2) 将 25 µl 稀释的标准品分装到标准孔中。

3) 将 25 µl 标准稀释缓冲液分装到对照(零)孔中。

4) 将 25 µl 稀释样品分装到样品孔中。在 37 °C 下孵育 1 小时。

5) 将 25 µl 检测试剂 A 分装到每个孔中。在 37 °C 下孵育 1 小时。

6) 洗涤 3 次。

7) 将 25 µl 检测试剂 B 分装到每个孔中。在 37°C 下孵育 30 分钟。

8)洗涤5次。

9) 将 25 µl TMB Substrate 分装到每个孔中。在 37°C 下孵育 10-20 分钟。

10) 分装 20 µl 终止液。

11) 在 450 nm 处测量 OD。

 

结果计算:

为了计算,平均每个参考标准和每个样品的 OD450 重复读数,并减去平均对照(零)OD450 读数。标准曲线可以绘制为每个参考标准溶液的相对 OD450 [Y] 与每个标准溶液的相应浓度 (X)。样品的 THPO 浓度可以从标准曲线中插值。

 

分析精度:

测定内精密度(测定内精密度):在一块板上分别测试了 3 个具有低、中、高水平的血小板生成素 (THPO) 的样品 20 次。

测定间精密度(测定之间的精密度):在 3 个不同的板上测试了 3 个具有低、中和高水平的血小板生成素 (THPO) 的样品,每个板重复 8 次。

CV (%) = (标准偏差/平均值) × 100

测定内:CV<10%

测定间:CV<12%

 

Abbexa研究工具包括一抗、二抗、同型对照、蛋白质、酶联免疫 (ELISA)试剂盒和酶等生物试剂,与各地的实验室合作,致力于为生物医学研究市场提供高质量科研工具。艾美捷科技是Abbexa的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。


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