怎么使用DAPI进行染色

1. DAPI染色实验简介：
当使用DAPI与双链DNA结合染色时，荧光强度可以提高约20倍。如果与单链DNA结合，则不会增强荧光。 DAPI的化学名称为4,6-二mid基-2-苯基吲哚（4,6-二mid基-2-苯基吲哚）。 DAPI可以结合双链DNA插槽，尤其是AT碱基，并且还可以在DNA序列中插入少于3个连续的AT碱基对。当它与双链DNA结合时，荧光强度可以增加约20倍。如果与单链DNA结合使用，荧光不会增加。因此，DAPI染色法是一种简单，快速，灵敏的DNA检测方法。实验方法。尽管DAPI的荧光强度低于Hoechst，但其荧光稳定性优于Hoechst。其特异性高于溴化乙锭和碘化丙啶。

2. DAPI染色实验所需的材料：
（1）0.01mol / L PBS（pH7.0）：取34ml 0.1mol / L NaH2PO4？H2O，66ml 0.1mol / L Na2HPO4、0.9g NaCl溶解于900ml二次蒸馏水； （2）DAPI储存溶液：将0.5mg DAPI溶于5ml PBS中，分装，并在低温下长时间保存； （3）DAPI工作液：用PBS稀释DAPI储存液至终浓度为0.1ug / ml。

3. DAPI染色实验操作步骤：
（1）将培养的单层细胞（未固定）或新鲜组织等冷冻切片，用PBS冲洗5分钟； （2）DAPI工作溶液在室温下染色5-20分钟（根据实验材料而定）（取决于染色结果）； （3）PBS冲洗； （4）水溶性贴片，游离细胞也可以直接用含DAPI的PBS贴片； （5）荧光显微镜观察。

四、DAPI染色实验所需试剂清单

序号产品名货号CAS备注1PBS缓冲液HC2031

2磷酸氢二钠：SS1345
3无水磷酸二氢钠：SS1337
4氯化钠：JT0001
5DAPI染色液：HC0622

以上为DAPI染色实验所学的试剂，请选好优质试剂，以免造成实验失败。