细胞死亡第二弹
前面我们讲了，细胞死亡包括被动的物理因素导致的细胞坏死和程序性死亡，而程序性死亡又包括坏死和凋亡；
无论是物理因素导致的细胞坏死还是程序性死亡中的坏死，都包括：
细胞膜破裂；
炎症反应；
不同的是，他们坏死发生的起因不同，一个是物理因素，一个是某些通路诱发的；
凋亡与坏死的区别是，凋亡不会发生炎症反应，因为凋亡发生时，会形成凋亡小体，细胞内容物不会暴露，所以没有炎症发生；
如果你用某些物质处理细胞后，细胞死亡了，如何判断它属于哪种死亡方式呢？
首先，判断细胞膜是否破裂，检测方法包括：
形态学观察：透射电镜或扫描电镜观察，如果有一个个膜完整的小体，那就是凋亡；
免疫荧光或流式方法：PI或7-AAD染色，因为PI，7-AAD可以与DNA结合，如果细胞膜破裂，染料就可以进入细胞内，从而发荧光；
如果细胞膜破裂，那就是坏死，再通过诱因判断是程序性坏死还是被动的细胞坏死，如果是物理因素，比如极端环境，那就是被动的细胞坏死；
前面提到了凋亡的特点，我们可以把凋亡理解为一种正常现象，因为没有炎症发生，是机体的一种生理反应，比如在胚胎发育过程，“废弃”的细胞自动凋亡；
1965年澳大利亚病理学家John Kerr发现，当小鼠门静脉被阻断时，肝实质细胞会形成很多细胞膜包被的圆形小泡，还包裹着固缩的染色质，并将这种细胞死亡方式命名为皱缩式坏死，1972年正式更名为细胞凋亡apoptosis；在后续的漫长研究中，科学家们发现，凋亡的下游关键标志是Caspase-3的剪切激活，当该基因突变时，凋亡无法发生，因为Caspase-3是最终诱发凋亡小体形成的信号；而Caspase-3的激活有两种方式：通过凋亡体；或Caspase-8；
因此，检验细胞凋亡的金标准包括Caspase3是否激活，另外，因为凋亡发生早期，磷脂双分子层外翻，所以也可以通过免疫荧光染色（Annexin V+PI/7-AAD）检测凋亡的发生，Annexin V可以特异性识别磷脂酰丝氨酸；
无论凋亡还是坏死，细胞活力都会降低，所以都可以通过检测ATP判定细胞活力，有很多试剂盒可以做这个；
凋亡虽然大多数发生在胚胎发育或正常生理反应中，不正常的凋亡会引发疾病，如正常凋亡的逃避，引发癌症；
下一弹，将和大家聊聊“细胞焦亡”，它也是坏死的一种~又与之前的程序性死亡有些不同~
