免疫检查点基础研究如何乘风破浪发5+，你get到了吗？

随着肿瘤免疫治疗时代的到来，免疫检查点及其调节因子无疑是目前研究热点之一。

下面小编就跟大家分享一篇基础医学的文章，这篇文章的题目是B7-H5 blockade enhances CD8+ T-cell-mediated antitumor immunity in colorectal cancer，于2021年发表在Cell Death Discovery上，杂志的影响因子为5.241。

这篇文章探索了一种新型的负性免疫检查点调节因子B7-H5在结直肠癌（CRC）中表达的临床意义以及在肿瘤微环境中的作用。下面我们就来具体看下这篇文章的主要结果吧。

1、B7-H5在CRC组织中高表达，与结直肠癌患者预后相关

本文采用免疫组化（IHC）方法检测结直肠癌组织中B7-H5的蛋白表达。如图1A所示，在CRC组织的免疫细胞中检测B7-H5蛋白的表达。根据免疫组化表达强度，B7-H5的表达分为0、1+、2+和3+（图1A）。观察到97.7%的肿瘤组织表达B7-H5，2.3%的肿瘤组织不表达B7-H5（表1）。而且，与正常癌旁组织相比，B7-H5在肿瘤组织中的表达明显增加（图1B）。而且，B7-H5的表达与淋巴结受累率（P = 0.036）、AJCC分期（P= 0.037）和生存期（P= 0.026）显著相关（表1）。与B7H5低表达的患者(IHC评分：O和1+）相比，B7-H5高表达的患者（IHC评分：2+和3+）的总生存期更短（图1C）。

2、结直肠癌组织中B7H5表达和CD8+ T细胞浸润

B7-H5表达与结直肠癌组织中CD8+ T细胞浸润呈显著负相关（r= -0.3709，P < 0.001，图2A、B）。为了对结直肠癌组织中B7-H5表达及CD8+ T浸润的预后价值进行评价，本研究将B7-H5/CD8的表达分为四种类型，分别是B7-H5lowCD8+Tlow、B7-H5lowCD8+Thigh、B7-H5highCD8+Tlow和B7-H5highCD8+Thigh。Kaplan-Meier生存分析结果显示，B7-H5highCD8+Tlow组患者预后明显较其他三组差（图2C）。单因素和多因素分析显示，年龄、N分期、B7-H5高水平表达、CD8+ T低浸润水平是结直肠癌患者总生存的危险因素（表2）。

3、B7-H5抑制后抑制肿瘤生长，促进CD8+ T细胞浸润

为探讨B7-H5在结直肠癌中的作用，建立MC38小鼠肿瘤模型并给予B7-H5单抗。结果发现，B7-H5单抗治疗显著抑制了MC38肿瘤的生长（图3A）。然后研究了B7-H5单抗的治疗效果是否与CD8+ T细胞相关。免疫荧光染色结果表明，通过观察MC38肿瘤组织中CD3+ T细胞的比例，B7-H5单抗治疗明显增强免疫细胞浸润（图3B）。与对照组相比，B7-H5单抗治疗组的肿瘤组织中CD8+ T细胞的比例显著增加（图3B）。流式细胞术检测也得到了相似的结果（图3C）。

4、B7-H5阻断介导的肿瘤生长抑制是CD8+ T细胞依赖的

在证实了B7-H5抑制增加了CD8+ T细胞的浸润后，研究进一步试图探索B7-H5阻断的治疗效果是否依赖于CD8+ T细胞。如图4所示，CD8+ T细胞的缺失明显破坏了单独抗B7-H5阻断的抗肿瘤作用。

5、B7-H5阻断促进CD8+ T细胞表达Granzyme B

研究进一步探索了B7-H5在体外调节CD8+ T细胞功能中的作用。通过流式细胞术分析使用和不使用B7-H5单抗处理后CD8+ T细胞中的细胞内Granzyme B和 IFN-γ水平。与对照组相比，B7-H5 单抗组中Granzyme B阳性CD8+ T细胞的比例显着增加（图 5A）。然而，B7-H5 抑制对IFN-γ阳性CD8+ T 细胞的比例没有影响（图 5B）。

以上就是本研究的主要结果啦，希望对大家临床和基础实验设计思路有所帮助。后期我们会继续为大家放送优质文献、SCI写作技巧等，感兴趣的小伙伴赶紧关注我们"A科研显微镜"吧。