被覆上皮知识点
人体结构的四个层次:
细胞:人体结构和基本结构的功能单位
组织:由一群结构和功能相同或相似的细胞或细胞外基质组成
器官:由组织有机地结合起来而组成
系统:由结构相似且功能相关的器官构成
组织学:研究正常人体的微细结构及其相关功能的学科
光镜结构:一般光学显微镜下所见的形态
超微结构:电子显微镜下显示的结构
细胞/细胞间质(细胞外基质)→组织(上皮组织、结缔组织、肌肉组织、神经组织)→器官→系统→人体
细胞学的提出和组织学的建立
1838年和1839年,德国人施旺和施莱登提出了细胞学说
19世纪中叶,建立了组织学
电子显微镜的发明和超微结构的发现
1932年,德国人卢斯卡和科诺尔发明了显微镜
当代组织学:免疫组织化学和原位杂交术
组织学研究技术
显微镜
分辨率:是指能够分辨相邻两点之间的最小距离
光学显微镜:R=0.2微米
电子显微镜:R=0.2纳米
(一)普通光镜技术
石蜡切片法(适用于柔软的组织)
主要步骤:取材、固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、展片与粘片、脱蜡复水、染色、脱水、透明和封片
实验仪器:石蜡切片机、温箱、显微镜、载玻片、盖玻片、染色缸、毛笔等
实验主要试剂:不同浓度的乙醇、二甲苯、苏木素、伊红染色液、中性树胶等
1)取材
2)固定:(为保持组织细胞原有形态结构,便于组织硬化便于切片和染色),固定剂有甲醛、苦味酸、Bouin's固定液、 Zenker's固定液固定30分钟
3)脱水
为了在包埋时,使石蜡更好地进入组织内部,必须对其进行脱水处理
脱水剂有两种类型:非石蜡溶剂(乙醇、丙酮等)和兼石蜡溶剂(正丁醇)
常用的脱水机是乙醇,本次实验采用乙醇脱水的方式,脱水时采用浓度递增的方式,分别在75%、90%、95%、100%的酒精中各脱水十分钟
4)透明:用二甲苯完全置换出酒精
组织块经非石蜡溶剂(乙醇)脱水后,通过透明,透明剂能同时与脱水剂和石蜡混合。它取代了脱水剂后,石蜡能够顺利渗入组织。透明剂种类很多,最常用的是二甲苯、甲苯、苯和氯仿等。本次实验透明剂使用二甲苯。
具体方法是将二甲苯、无水酒精混合后透明一小时,然后用纯二甲苯透明一小时,再用纯二甲苯透明40分钟
5)浸蜡:在60~62℃时,用液态石蜡完全置换出二甲苯,室温时石蜡凝固成固态,内含待切组织
将透明好的组织放入加热的熔蜡中,浸蜡1~2小时
浸蜡的目的是使石蜡进入组织,起到支持作用,使组织内部硬度均匀,以助切出完整的切片。石蜡的熔点为54~64℃
6)包埋
是使浸透蜡的组织块包裹在石蜡中
先准备好磨具,将熔蜡倒入磨具中,迅速用预热的镊子夹取组织块,平放在磨具底部,切面向下
7)切片、展片与粘片
先用刀片对组织蜡块进行修饰,修饰后的蜡块粘附于切片机上后,调整切片机,选择适当的切片厚度,开始切片,切成连续的蜡片,最后分割蜡带
分开的蜡片放在42℃温水中,使蜡片展开,用干净的载玻片捞取展开后的蜡片,调整蜡片的位置使其位于载玻片中央,自然风干后待染
8)脱蜡复水
染色液多为水溶液,所以染色前要将石蜡洗去
把切片浸入二甲苯5~10分钟,以溶去石蜡,再次用二甲苯清洗残存的石蜡2~3分钟,脱蜡后将切片按顺序放入100%、95%、90%、75%的酒精中浸泡1~2分钟,以洗去切片上的二甲苯
9)染色
将切片放入苏木精染色液中染色10分钟,用自来水洗去浮色。再将切片放入伊红染色液中染色10分钟,用自来水冲洗,可以看到切片组织被染成蓝色。
10)封片
将染好的载玻片上滴1~2滴中性树胶,将洁净的盖玻片倾斜放下,封片。
11)观察
HE染色(苏木素和伊红)
苏木精:碱性染料,把细胞核染成紫蓝色
伊红:酸性染料,把细胞质染成粉红色
苏木素是碱性染料,使细胞核和细胞质中的核酸等酸性物质染成紫黑色,被苏木素染色的物质本身为酸性,对碱性染料亲和能力强的称为嗜碱性
伊红是酸性染剂,粉红色。是细胞质和细胞外基质中的碱性蛋白成分染成粉红色,被伊红着色的结构本身为碱性,对酸性染料亲和力强称为嗜酸性
对碱性染料和酸性染料亲和力都不强的称为嗜中性
如果某结构显示的颜色与染料本身的颜色不同,则该结构具有异染性
如果某结构能将银离子还原成银原子,并吸附银原子而使自身显示棕黑色,则该结构具有嗜银性
一、分类及分布
被覆上皮:身体表面 ,称贴于体腔或有腔器官的腔面,某些器官的外表面

腺上皮
特殊上皮:肌上皮细胞、感觉上皮细胞
功能:保护、吸收、分泌、排泄
上皮组织的一般特点:
1、由大量形态规则、排列密集的上皮细胞和极少量的细胞外基质组成
2、上皮细胞具有明显的极性,即细胞的不同表面,包括游离面、侧面和基底面在结构和功能上具有明显差别的上皮基底面附于基膜上,并借此与结缔组织相连
3、上皮内大都无血管,所需营养依靠结缔组织内的血管提供
4、上皮组织内可有丰富的感觉神经末梢

分类原则
分类原则细胞层数:单层、双层
浅层细胞垂直切面状态:扁平、立方、柱状


单层扁皮上皮

表面观:细胞呈不规则或多边形,细胞核椭圆形、居中
内皮:心、血管、淋巴管

间皮:胸膜、腹膜、心包膜、某些器官外表面

其他:肺泡及肾小囊壁层等
功能(扁薄、光滑):
利于物质交换
利于血液和淋巴液流动
减少器官摩擦

单层立方上皮
表面观:细胞呈多角形
垂直切面观:细胞呈立方形,核圆居中
分布:肾小管、甲状腺泡
功能:吸收和分泌
单层柱状上皮
表面观:细胞呈多角形
垂直切面观:细胞呈柱状,核长椭圆形,靠近细胞基底部
杯状细胞:杯状。胞质顶部膨大,充满黏原颗粒,底部狭窄,含深染的核,颗粒内含黏蛋白。分泌后与水结合形成粘液。润滑和保护上皮。
分布:胃、肠、胆囊、子宫、输卵管等
功能:吸收和分泌
假复层纤毛柱状上皮
1)由柱状细胞、环状细胞、梭形细胞和锥形体细胞组成
2)细胞形态不一,细胞核不在同一平面上
3)柱状细胞游离面常有纤毛
分布:呼吸管道的腔面
功能:分泌、保护
复层扁平上皮
分布:角化的复层扁平上皮:皮肤表皮
未角化的复层扁平上皮:口腔、食管、直肠等
功能:保护、屏障(耐摩擦、阻止异物侵入)
复层柱状上皮
特点:浅层细胞为矮柱状、深层细胞多边形
分布:眼结膜、男性尿道等
功能:保护
变移上皮
特点:
1)分表层细胞、中间层细胞和基底细胞,表层细胞较大较厚,称为盖细胞
2)细胞形状、层数可随器官收缩与舒张状态而变化
空虚的膀胱:上皮厚,细胞层数增多,细胞呈大的立方形
充盈扩张的膀胱:上皮厚,细胞层数减少,细胞呈扁梭形