FITC-conjugated Streptavidin，关于链霉亲和素偶联物 FITC-标记的方法
FITC-conjugated Streptavidin，关于链霉亲和素偶联物 FITC-标记的方法
今天小编整理并分享关于链霉亲和素偶联物 FITC-标记的方法：
标记过程：
准备FITC溶液：将FITC粉末溶解在乙腈中，制备FITC的工作溶液。通常的浓度是1 mg/mL或更低。确保在暗处操作，因为FITC对光敏感。
激活Streptavidin：使用碳酸氢钠等化学试剂激活Streptavidin上的特定氨基酸残基，以便FITC能够与之反应。激活的Streptavidin通常以碱性缓冲液中处理。
FITC与Streptavidin反应：将FITC溶液加入到激活的Streptavidin中，使它们在室温下反应。反应时间可以根据实验需求进行调整，通常在1到2小时之间。
反应停止：将反应停止，通常是通过加入一些组织或蛋白质，以中和未反应的FITC。这有助于防止未反应的FITC残留在样品中。
纯化共轭物：使用分子量切割膜或其他纯化方法，从反应混合物中分离出FITC-conjugated Streptavidin。这个步骤可以去除未反应的FITC和其他杂质。
确认共轭物：使用光谱方法或其他分析技术来确认成功标记FITC到Streptavidin上。通常会检测FITC的吸收光谱和荧光光谱。
存储共轭物：存储FITC-conjugated Streptavidin，通常在冷藏条件下，以确保其稳定性和长期保存。
链霉亲和素（Streptavidin）偶联物中的FITC（Fluorescein Isothiocyanate）是一种常见的荧光标记，用于将荧光性质引入Streptavidin分子中，以便在生物学实验和应用中进行荧光标记和可视化。FITC的标记原理涉及到将FITC与Streptavidin分子中的氨基基团反应，形成稳定的FITC-Streptavidin共轭物。
Streptavidin/ RBITC，罗丹明B标记链霉亲和素
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