在单细胞测序实验中，悬液质量好坏是单细胞测序实验成功与否的关键，因此该实验对样本新鲜度要求极高。但对于现实存在的一些情况，会使得样本不能维持新鲜状态，如临床研究中，取样后需等病例结果才可确认样本是否入组，再如采样后由于一些原因需要保存或长距离运输。虽然对于冻存的组织样本可以实现单细胞核转录组测序，但其也有一些无法避免的问题，如缺少胞质RNA、结果指标风险大、对免疫细胞信息获取不友好等问题。
那是否可以尝试将新鲜组织冻存，待需要时再复苏并进行单细胞实验呢？如果可以，那将很好解决以上这些问题。

百奥益康团队在前人研究基础上，开发出一种高效的组织冻存液，使用该冻存液梯度冻存新鲜组织，—80℃保存后，仍能较好的恢复组织活性，从而满足冻存组织进行单细胞转录组测序实验的需求。

测试流程

利用百奥益康开发的组织冻存液梯度冻存小鼠新鲜组织，-80℃环境保存一周，取出后进行组织复苏，制备单细胞悬液，并对活性、结团率等指标进行检测。

测试结果

我们对新鲜的小鼠脾脏、肺、肾脏以及肝脏组织按以上流程进行实验，结果如下。

1.    小鼠脾脏组织

本次测试脾脏组织状态较好，新鲜组织解离结果质量很高，冻存复苏组织解离后活性仍然高于90%，结团率仅2.24%，有核率也高达67%。

2.小鼠肺组织测试

本次测试肺组织状态较好，新鲜组织解离结果质量很高，冻存复苏组织解离后活性为88.48%，结团率仅5.84%，有核率也高达86%。

3.小鼠肾脏组织测试

与小鼠脾脏和肺组织不同，肾脏冻存复苏组织解离结果与新鲜组织相比，结团率有一定升高，但活性和有核率下降比例正常。

4.小鼠肝脏组织测试

肝脏冻存复苏组织解离结果与新鲜组织相似，结果均较好，肝脏冻存复苏组织解离后有核率略低，但与新鲜组织相比，下降比例正常。

测试结论

整体来看，组织样本冻存后复苏方案，如果新鲜组织原本状态不错的话，冻存复苏后结果能够满足单细胞转录组测序实验，为解决临床样本难保存、保存及运输等问题提供了全新解决方案。

李超 | 文案

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